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大鼠頜骨成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 13:37:43瀏覽次數:266

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 頜骨組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠頜骨成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

頜骨組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自頜骨組織;頜骨,是指頜部的骨頭,分為上頜骨和下頜骨。構成口腔上下部的骨頭和肌肉組織,上部叫上頜,下部叫下頜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

轉錄因子ELYS蛋白抗體 GTP結合蛋白10封閉多肽 人鎂依賴性磷1(MDP1)ELISA試劑盒

熱休克因子蛋白4抗體 9號染色體開放閱讀框59封閉多肽 人梅毒螺旋體(TP)抗體(IgM)試劑盒ELISA

降鈣單克隆抗體 鋅指蛋白148封閉多肽 人梅毒螺旋體(TP)抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒

高遷移率族蛋白B1抗體 短鏈脫氫/還原家族X封閉多肽 人麻疹病毒(MV)抗體(IgM)ELISA試劑盒

泛特異性SENP7抗體 脯氨酰羥化封閉多肽 人麻疹病毒(MV)抗體(IgG)試劑盒ELISA

神經細胞粘附分子配體1重組兔單克隆抗體 γ1氨基丁受體GABAA Rβ1封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF-Ab)檢測試劑盒elisa

檸檬合成CISY抗體 骨形態發生蛋白2受體封閉多肽 人絡氨(TYR)ELISA試劑盒

乙酰化化組蛋白H2B (Lys15)鼠單克隆抗體 通用轉錄因子3C多肽5/TFIIIC90封閉多肽 人輪狀病毒抗原(RV Ag)試劑盒ELISA

磷化蛋白激B抗體 β-酪蛋白封閉多肽 人輪狀病毒(RV)抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒

G蛋白偶聯受體43抗體 防御β-108B/β-defensin 108B封閉多肽 人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒

短卷曲螺旋蛋白SCOC抗體 跨膜蛋白176A封閉多肽 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒ELISA

結合轉化激活因子CITED1抗體  重組跨膜蛋白Smoothened 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)檢測試劑盒elisa

線粒體核糖體蛋白L34抗體 絲裂原活化的蛋白激p38β封閉多肽 人卵清白蛋白ELISA試劑盒

COMM結構域蛋白4抗體 鈉通道亞基β4封閉多肽 人卵泡抑樣蛋白1(FSTL-1)試劑盒ELISA

毛發角蛋白37抗體 肌側索硬化癥相關蛋白2(2號染色體)封閉多肽 人ELISA檢測試劑盒

核苷結合蛋白X抗體 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2封閉多肽 人酰基轉移(LCAT)ELISA試劑盒

FAM162A蛋白抗體 Ras-GTP激活蛋白3封閉多肽 人卵巢癌抗原X1(OVX1)試劑盒ELISA

1號染色體開放閱讀框49抗體 磷化乳腺癌易感基因相互作用蛋白1封閉多肽 人氯離子胞內通道蛋白4(CLIC4)檢測試劑盒elisa
大鼠頜骨成纖維細胞C2C12小鼠成肌細胞專用培養基英文名稱:C2C12細胞專用培養基500ML

C3H/10T1/2 Clone8小鼠胚胎成纖維細胞專用培養基英文名稱:C3H/10T1/2 Clone8細胞專用培養基125ML

C3H/10T1/2 Clone8小鼠胚胎成纖維細胞專用培養基英文名稱:C3H/10T1/2 Clone8細胞專用培養基500ML

CT26小鼠結腸癌細胞專用培養基英文名稱:CT26細胞專用培養基125ML

CT26小鼠結腸癌細胞專用培養基英文名稱:CT26細胞專用培養基500ML

CT26+LUC小鼠結腸癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:CT26+LUC細胞專用培養基125ML

CT26+LUC小鼠結腸癌熒光標記細胞專用培養基英文名稱:CT26+LUC細胞專用培養基500ML

 


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