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大鼠肝內膽管上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:21:22瀏覽次數:231

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肝臟組織
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詳細介紹

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產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

大鼠肝內膽管上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肝臟組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調控的分泌和吸收,在保持、調整和擴大膽小管的結構中發揮重要作用,肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%,其在肝內膽道系統內形成復雜的網狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程,在肝臟疾病的發生發展過程中起一定的作用。研究表明,常見的肝內膽管病變例如原發性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位,進而引起肝內膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發病機制、診斷和治療具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原灌注消化法后,再用膠原-DNA聯合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中,通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

1號染色體開放閱讀框198抗體 SUSD3蛋白封閉多肽 

細胞核受體ERBA相關基因2抗體 水解結構域蛋白13封閉多肽 

人乳頭瘤病毒18型E4抗體 組蛋白去甲基化UTX封閉多肽 

環指蛋白19抗體 19號染色體開放閱讀框66封閉多肽 

Rho相關結構域BTB蛋白質1抗體 α-甲基酰基消旋封閉多肽  

英文名稱: NADPH 衣殼蛋白-ζ1封閉多肽 

Naked1蛋白抗體 上皮細胞特異性轉錄因子1封閉多肽 

抗表皮生長因子抗體 LSM10相關蛋白封閉多肽 

葡萄糖調節蛋白78單克隆抗體 NUDT12蛋白封閉多肽 

TIP30蛋白抗體 中胚層配對同源蛋白2封閉多肽 

菱形結合域同源蛋白RHBDF1抗體 周期E1封閉多肽 

B細胞遷移基因1抗體 川楝牛血清白蛋白偶聯物 

胞吐分泌蛋白Sec8抗體 磷化叉頭蛋白4封閉多肽 

溶質載體家族22成員14抗體 DYX1C1蛋白封閉多肽 

內質網蛋白ERp72抗體 磷化蛋白激B封閉多肽 

組蛋白乙酰轉移KAT7抗體 豬圓環病毒Ⅱ型衣殼蛋白封閉多肽 

骨巢蛋白抗體 PSP封閉多肽 

HER4抗體 zcrb1蛋白封閉多肽 
大鼠肝內膽管上皮細胞小鼠表皮角化細胞培養基100mL小鼠表皮角化細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠表皮角化細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠表皮角化細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠表皮角化細胞的體外培養。

BE(2)-M17細胞專用培養基125mL×4BE(2)-M17細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持BE(2)-M17細胞佳的生長狀態。本產品中已包含BE(2)-M17細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BE(2)-M17細胞的體外培養。

人牙齦上皮細胞培養基100mL人牙齦上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人牙齦上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人牙齦上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人牙齦上皮細胞的體外培養。

人胃黏膜上皮細胞培養基100mL人胃黏膜上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人胃黏膜上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人胃黏膜上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胃黏膜上皮細胞的體外培養。

SK-N-AS細胞專用培養基125mL×4SK-N-AS細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SK-N-AS細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SK-N-AS細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SK-N-AS細胞的體外培養。

TNM-FH昆蟲細胞培養基125mL×4-

小鼠輸尿管上皮細胞培養基100mL小鼠輸尿管上皮細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠輸尿管上皮細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠輸尿管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠輸尿管上皮細胞的體外培養。


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