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兔胰腺星狀細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:57:04瀏覽次數(shù):285

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胰腺組織
兔胰腺星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:AV3人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLAV3人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLBALL-1人B淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLBALL-1人B淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLBCPaP人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔胰腺星狀細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳suan氫鈉、胰dan白原、脂肪、淀粉等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌生長抑su,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達(dá)Desmin蛋白,活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時(shí)間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,而不再表達(dá)Desmin,說明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動(dòng)了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時(shí),在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

神經(jīng)束蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體24封閉多肽 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒

胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 黑皮質(zhì)4受體封閉多肽 大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒ELISA

20號(hào)染色體開放閱讀框152抗體 SPIRE2蛋白封閉多肽 大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA檢測(cè)試劑盒

配子生成抗體 X三體綜合癥相關(guān)蛋白FUNDC1封閉多肽 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)elisa試劑盒

ATP-依賴的RNA解旋p47抗體 G蛋白偶聯(lián)受體39封閉多肽 大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)試劑盒elisa

BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移PCAF封閉多肽 大鼠血管緊張?jiān)?aGT)檢測(cè)試劑盒elisa

血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 Fas活化的絲/蘇氨激封閉多肽 大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體 唾液糖蛋白受體1封閉多肽 大鼠丙二醛(MDA)試劑盒ELISA

RAG1激活蛋白1抗體 分泌載體膜蛋白4封閉多肽 大鼠超氧化物歧化(SOD)ELISA檢測(cè)試劑盒

NFkB誘導(dǎo)激抗體 重組猴痘病毒E8L蛋白 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)elisa試劑盒

高遷移率族蛋白B1抗體 軟骨基質(zhì)蛋白封閉多肽 大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)試劑盒elisa

KLHDC10蛋白抗體 ATP依賴的干擾反應(yīng)蛋白1封閉多肽 大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測(cè)試劑盒elisa

成纖維細(xì)胞生長因子21抗體 核孔復(fù)合蛋白Nup214封閉多肽 大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒

血紅氧合2抗體 尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運(yùn)子1封閉多肽 大鼠胰淀(Amylin)試劑盒ELISA

白細(xì)胞共同抗原抗體 磷化叉頭蛋白家族1(Ser319)封閉多肽 大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA檢測(cè)試劑盒

伴肌動(dòng)蛋白相關(guān)錨定蛋白抗體 副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠細(xì)胞色C(Cyt-C)elisa試劑盒

細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 胞吐分泌蛋白Sec6封閉多肽 大鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒elisa

Runx3抗體 SMCR8蛋白封閉多肽 大鼠黑色細(xì)胞抗體(MCAb)檢測(cè)試劑盒elisa
兔胰腺星狀細(xì)胞JIMT-1人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:JIMT-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

Jurkat(clone E6-1)人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Jurkat(clone E6-1)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

Jurkat(clone E6-1)人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Jurkat(clone E6-1)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

K1(GLAG-66)人甲狀腺癌

細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:K1(GLAG-66)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

K1(GLAG-66)人甲狀腺癌

細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:K1(GLAG-66)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

K562人慢性骨髓性白血病系細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:K562細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

K562人慢性骨髓性白血病系細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:K562細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML


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