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人真皮成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 11:44:47瀏覽次數:265

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
人真皮成纖維細胞的相關產品:sh-sy5y轉染野生型人神經母細胞瘤細胞人細胞系1×106SIHa人子宮頸鱗癌細胞人細胞系1×106SJSA-1人骨肉瘤細胞人細胞系1×106SK-BR-3人乳腺癌細胞人細胞系1×106SK-BR-3+LUC人乳腺癌細胞人細胞系1×106

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人真皮成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

皮膚組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織內的真皮層;皮膚組織來源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據需求選用;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先中性dan白消化、后胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

神經膠質蛋白(肝癌相關基因2)抗體 NBPF7蛋白封閉多肽 人血管內皮抑抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒

腦轉錄因子4蛋白抗體 N聚糖多肽蛋白1封閉多肽 人血管緊張Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)試劑盒ELISA

谷氨草酰乙轉氨1樣蛋白1抗體 信號誘導增殖相關蛋白1樣蛋白2封閉多肽 人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA檢測試劑盒

碳酐1抗體 內皮B受體封閉多肽 人α肌動蛋白(αActin)elisa試劑盒

MSH同源蛋白1樣蛋白抗體 鳥苷環化激活蛋白1封閉多肽 人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)試劑盒elisa

細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體 1號染色體開放閱讀框77封閉多肽 人瘦受體(LEPR)檢測試劑盒elisa

細胞質膜微囊蛋白-1抗體 磷化驅動蛋白樣蛋白1封閉多肽 人血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒

英文名稱: ATF4 孕激受體β(MPRβ)封閉多肽 人血管緊張Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)試劑盒ELISA

細胞分裂周期蛋白25C抗體 腦源神經營養因子封閉多肽 人血管生成4(ANG-4)ELISA檢測試劑盒

磷化一氧化氮合成3(內皮型)抗體 Lgi3蛋白封閉多肽 人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)elisa試劑盒

高爾基體自身蛋白8B抗體 鋅指蛋白ZNF919封閉多肽 人熱休克因子1(HSF-1)試劑盒elisa

乙酰化化組蛋白H2B (Lys120)鼠單克隆抗體 半乳糖基轉移2封閉多肽 人血管活性肽抑制劑(VPI)檢測試劑盒elisa

鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體 FMS樣酪氨激3封閉多肽+O15197 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒

葉受體4抗體 鋅指蛋白321B封閉多肽 人缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒ELISA

磷化KB抑制蛋白激γ抗體 轉錄中介因子Tif1β封閉多肽 人8-異構前列腺F2α(8-epi-PGF2α)ELISA檢測試劑盒

卷曲螺旋結構域蛋白30抗體 血紅蛋白theta亞型1封閉多肽 人血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)elisa試劑盒

細胞表面趨化因子受體6(CD196)抗體 平足蛋白/淋巴管內皮細胞蛋白封閉多肽 人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)試劑盒elisa

LRIG2抗體 鋅指蛋白214封閉多肽 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)檢測試劑盒elisa
人真皮成纖維細胞MC38+LUC小鼠結腸癌細胞熒光標記英文名稱:MC38+LUC1×106DMEM+10%FBS+1%L-+1%NEAA+1%鈉+1% HEPES+1%P/S (MC38鼠源鑒定)報告

MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞英文名稱:MC3T3-E11×106MEMα+10%FBS+1%P/S  (STR鼠源鑒定)報告

MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14英文名稱:MC3T3-E1subclone 141×106MEMα(添加NaHCO3 1.5g/L+肌醇 43.2mg/L+葉 8.82mg/L+β-巰基乙醇 7.8mg/L)+ FBS 10%+P/S 1%(STR鼠源鑒定)報告

MEF小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:MEF1×106D/F12+10%FBS+1%P/S  (非永生化)提供免疫熒光鑒定報告

MEF(絲裂霉C處理)小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:MEF(絲裂霉C處理)1×106D/F12+10%FBS+1%P/S 不提供STR鑒定報告

MFC小鼠前胃癌細胞英文名稱:MFC1×1061640+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

MH-S小鼠肺泡巨噬細胞英文名稱:MH-S1×1061640+10%FBS+0.05mM 巰基乙醇(β-Me)+1%P/s(STR鼠源鑒定)報告

 


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