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小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:59:20瀏覽次數(shù):284

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 海綿體組織
小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:U-937 (人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶LS513 (人結(jié)直腸癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MT-4 (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確)(僅提供凍存管)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶SW

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

海綿體組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自海綿體組織;陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu),它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,而海綿體內(nèi)皮細(xì)胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時(shí),膠原的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。如果消化時(shí)間延長(zhǎng)或膠原濃度過大,平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞也將被消化下來,從而影響海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的純度。因此,比較篩選合適的膠原濃度和消化時(shí)間是成功分離海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)鍵。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合消化法結(jié)合機(jī)械分離法、并用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Bcl-2同源拮抗劑抗體 重組人CD80/B7-1蛋白 

MORC4蛋白抗體 GTP結(jié)合蛋白R(shí)EM1封閉多肽 

Rho家族GTP3抗體 磷化G氨基丁B型受體2封閉多肽 

DULLARD蛋白抗體 激活復(fù)合物亞基1封閉多肽 

心磷脂合成1抗體 NADH氧化還原輔7封閉多肽 

INTS4蛋白抗體 16號(hào)染色體開放閱讀框7封閉多肽 

人泌乳單克隆抗體 重組大鼠白細(xì)胞介-18蛋白 

神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白3抗體 黑色瘤硫軟骨蛋白多糖封閉多肽 

磷脂性磷蛋白DPPL2抗體 鈉碘單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC26A4封閉多肽 

天冬酰胺合成 熱休克蛋白104封閉多肽 

絲氨甲基化mSHMT抗體 血紅氧合2封閉多肽 

神經(jīng)囊泡膜蛋白2抗體 ATP依賴RNA解旋DDX59封閉多肽 

英文名稱: Human Tau-4 金屬抑制因子RECK封閉多肽 

磷化干擾誘導(dǎo)的雙鏈RNA活化蛋白激抗體 鋅指蛋白232封閉多肽 

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員21B抗體 ATP-依賴的RNA解旋29封閉多肽 

過氧化物體膜蛋白2抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38封閉多肽 

英文名稱: AKT1 / AKT2 / AKT3 人IgG-Fc蛋白 

雌激反應(yīng)鋅指蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體71封閉多肽 
小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基100mL小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基專門為小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化而開發(fā),針對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化效果。本產(chǎn)品不含血清成分,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。培養(yǎng)基組成成分成分名稱添加體積(規(guī)格200ML)添加體積(規(guī)格100ML)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化基礎(chǔ)培養(yǎng)基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍(lán)染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請(qǐng)根據(jù)試劑管上標(biāo)簽標(biāo)示溫度保存。

DMEM低糖(不含酚紅,含HEPES)500mL-

小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人心肌成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人心肌成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人心肌成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人心肌成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠直腸平滑肌細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠直腸平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠直腸平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM無糖 (含L-丙氨酰-L-、HEPES,不含鈉、酚紅)500mL-


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