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大鼠腸道干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:14:39瀏覽次數(shù):308

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腸組織
大鼠腸道干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代CIK細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代肌腱細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代淋巴細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代卵泡膜細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代支持細(xì)胞添加劑細(xì)胞培養(yǎng)基5mL(100X)

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腸道干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至gang門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過直腸經(jīng)gang門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細(xì)胞(ISC)也稱腸道上皮干細(xì)胞,主要位于腸黏膜隱窩內(nèi),其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下,位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部(腸腔方向)遷移,整個(gè)遷移過程大約3-5d,在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞。當(dāng)受到外界生理或病理信號(hào)作用時(shí),ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞,如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等,從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化后,用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細(xì)胞形態(tài)  球形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

亨廷頓相互作用蛋白M/X染色體開放閱讀框27抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框192封閉多肽 

鐵蛋白Fe65樣蛋白1抗體 B細(xì)胞白血病/淋巴瘤蛋白7封閉多肽 

HS3ST6蛋白抗體 XVII型膠原蛋白/膠原蛋白17/17型膠原蛋白封閉多肽 

5-甲酰環(huán)連接抗體 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移1封閉多肽 

ENY2蛋白抗體 FAM25A蛋白封閉多肽 

淀粉樣肽前體蛋白抗體 氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成6G封閉多肽 

鋅指蛋白28抗體 腦胰3封閉多肽 

磷化丁鹽反應(yīng)因子1抗體 脫氫封閉多肽 

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白10抗體 重組人白細(xì)胞介4受體蛋白 

磷化乙酰羧化抗體 天冬氨-胱氨特異性家族封閉多肽 

TRMT5蛋白抗體 ZDHHC6蛋白封閉多肽 

磷化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激2抗體 軸突蛋白3封閉多肽 

軸周蛋白PRX抗體 醌氧化還原封閉多肽 

9號(hào)染色體開放閱讀框21抗體 腎胺封閉多肽 

BRD1蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體激7封閉多肽 

FRMD5蛋白抗體 紅細(xì)胞糖苷α1封閉多肽 

微管相關(guān)蛋白抗體 耳蝸蛋白OTOS封閉多肽 

20號(hào)染色體開放閱讀框11抗體 心動(dòng)加速蛋白多肽封閉多肽 
大鼠腸道干細(xì)胞人乳腺癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人乳腺癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人乳腺癌組織源細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人乳腺癌組織源細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺癌組織源細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖培養(yǎng)基,干粉5×1L-

大鼠骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠骨細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠骨細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠骨細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SK-LU-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SK-LU-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SK-LU-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SK-LU-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SK-LU-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RIN-m5F細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4RIN-m5F細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RIN-m5F細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RIN-m5F細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RIN-m5F細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SW 982 [SW-982; SW982]細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW 982 [SW-982; SW982]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW 982 [SW-982; SW982]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW 982 [SW-982; SW982]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW 982 [SW-982; SW982]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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