詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產品名稱 | |
英文名稱 | Fructus chebulae |
貨號 | BJ-P988033 |
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
外基質磷酸糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human CD3d(Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit包裝5g
苯酚磺基轉移酶(PST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC22A2 ELISA Kit包裝100g
凝血因子Ⅶ(F7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A1 ELISA Kit包裝25g
解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC1A4 ELISA Kit包裝5g
N-乙酰轉移酶1(NAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A11 ELISA Kit包裝1g
氯離子通道輔助蛋白1(CLCA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC19A3 ELISA Kit包裝5g
絲氨酸肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A3 ELISA Kit包裝1g
NADP依賴性蘋果酶2(ME2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC20A1 ELISA Kit包裝5g
干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC38A1 ELISA Kit包裝1g
賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A34 ELISA Kit包裝1mg
原鈣黏素γA2(PCDHγA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A33 ELISA Kit包裝10g
賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Human SLC25A45 ELISA Kit包裝100g
訶子染料法PCR鑒定試劑盒價格噬尼古丁節(jié)桿菌Human CTCF (Transcriptional repressor CTCF) ELISA KIT用途: 微生物肥料
微紫青霉Human CTNNBIP1 (Beta-catenin-interacting protein 1) ELISA KIT拉丁屬名: Penicillium janthinellum
蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種Human CBR1 (Carbonyl reductase [NADPH] 1) ELISA KIT拉丁屬名: Bacillus thuringiensis
玉蕈、真姬菇Human CTSE (Cathepsin E) ELISA KIT拉丁屬名: Hypsizgus marmoreus (Perk) Bigelus
里氏木霉Human CPS1(Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial) ELISA Kit僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
黃傘(10號)Human CPVL (Probable serine carboxypeptidase CPVL) ELISA KIT僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
短波單胞菌屬Human AP2B1(AP-2 complex subunit beta) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas basaltis
枯草芽孢桿菌Human CARHSP1 (Calcium-regulated heat-stable protein 1) ELISA KIT拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Human BRD4(Bromodomain-containing protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。