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人外周血單核細胞

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更新時間:2023-04-21 15:07:16瀏覽次數:245

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人外周血單核細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

外周血

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內含有更多的非特異性脂,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續增大,直徑可達50-80μm,細胞內所含的溶體顆粒和線粒體的數目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛機制,還產生一些能促進內皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼壁半懸浮

細胞形態  圓形、巨噬細胞樣

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 紅細胞膜蛋白STOM封閉多肽 小鼠補體蛋白3(C3)ELISA檢測試劑盒

囊泡谷氨轉運蛋白2抗體 妊娠特異性β1糖蛋白11封閉多肽 小鼠(AZT)ELISA Kit

甘精胰島單克隆抗體 原鈣粘附蛋白α1封閉多肽 小鼠β葡糖苷(β-glucosidase) ELISA試劑盒

α1-chimaerin蛋白抗體 轉錄因子同源蛋白NKX2.4封閉多肽 小鼠多巴胺(DA)試劑盒 ELISA

9號染色體開放閱讀框43抗體 6號染色體開放閱讀框204封閉多肽 小鼠高靈敏度促甲狀腺激(U-TSH)ELISA檢測試劑盒

染色體區域穩定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區域穩定必需蛋白抗體 p60TRP蛋白封閉多肽 小鼠高敏甲狀腺(u-T4)ELISA Kit

電壓門控鉀通道蛋白KVβ.2抗體 腫瘤細胞調亡/死亡受體5封閉多肽 小鼠β葡萄糖醛苷(βGD) ELISA試劑盒

細胞色C氧化蛋白5B抗體 吲哚1封閉多肽 小鼠谷氨脫羧自身抗體(GAD-Ab)試劑盒 ELISA

脫氫激同功3抗體 甲型肝炎病毒細胞受體1封閉多肽 小鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白750抗體 Ras蛋白特異核苷釋放因子2封閉多肽 小鼠半乳糖6硫酯(Gal-6S) ELISA Kit

SCN2A抗體 肌漿/內質網鈣ATP2封閉多肽 小鼠甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒

BarX1蛋白抗體 1號染色體開放閱讀框38封閉多肽 小鼠苯丙氨(LPA) 試劑盒 ELISA

補體C1q腫瘤壞死因子相關蛋白6抗體 鈣粘蛋白相關神經受體8封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA檢測試劑盒

周期C抗體 2號染色體開放閱讀框53封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA Kit

Ki67蛋白抗體 T-激肽封閉多肽 小鼠抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒

環指蛋白109抗體 整聯蛋白重復蛋白2封閉多肽 小鼠apelin 12(AP12)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白323抗體 蛋白脂質蛋白2封閉多肽 小鼠α干擾(IFN-α)ELISA檢測試劑盒

G蛋白偶聯受體18抗體 eIF2Bδ蛋白封閉多肽 小鼠激(PK) ELISA Kit
人外周血單核細胞小鼠舌表皮細胞英文名稱:小鼠舌表皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠鼓膜上皮干細胞英文名稱:小鼠鼓膜上皮干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠角膜內皮細胞英文名稱:小鼠角膜內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠鞏膜上皮細胞英文名稱:小鼠鞏膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠視網膜mulller細胞英文名稱:小鼠視網膜mulller細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠牙齦成纖維細胞英文名稱:小鼠牙齦成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠結膜囊成纖維細胞英文名稱:小鼠結膜囊成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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