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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 組織來源 | 椎間盤組織 |
詳細(xì)介紹
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞分離退行性椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長(zhǎng)，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
5.方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 椎間盤組織 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
連接蛋白3抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體5封閉多肽 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA檢測(cè)試劑盒
7號(hào)染色體開放閱讀框46抗體 鋅指蛋白801封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF) ELISA Kit
干擾誘導(dǎo)的雙鏈RNA活化蛋白激單克隆抗體 FBXL12蛋白封閉多肽 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒
中腦核仁蛋白抗體 5號(hào)染色體開放閱讀框36封閉多肽 小鼠髓過氧化物(MPO)試劑盒 ELISA
甲狀腺激轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8抗體 FAM162B蛋白封閉多肽 小鼠顆粒B(Gzms-B)ELISA檢測(cè)試劑盒
AF750標(biāo)記小鼠抗人CD34單克隆抗體 SPRED2蛋白封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA Kit
長(zhǎng)鏈脂肪延長(zhǎng)長(zhǎng)ELOVL5抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框44封閉多肽 小鼠顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒
過氧化物8抗體 5-羥色胺受體1A封閉多肽 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 ELISA
DTX1抗體 腎細(xì)胞癌下調(diào)蛋白1封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA檢測(cè)試劑盒
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體 Bax封閉多肽 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit
組織C抗體 溶質(zhì)載體家族25成員42封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒
神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 血小板源性生長(zhǎng)因子A相關(guān)蛋白2封閉多肽 小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 ELISA
G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體 原鈣粘蛋白γA1封閉多肽 小鼠腎(Renin)ELISA檢測(cè)試劑盒
S轉(zhuǎn)移A3抗體 視神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)蛋白/早老結(jié)合蛋白封閉多肽 小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA Kit
磷脂DDHD1抗體 表皮細(xì)胞表面抗原1/Esa1封閉多肽 小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒
DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體 睪丸蛋白聚糖2封閉多肽 小鼠泛蛋白(Ub)試劑盒 ELISA
轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 線粒體蘋果脫氫2封閉多肽 小鼠αL艾杜糖苷(IDUA)ELISA檢測(cè)試劑盒
骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白35成員D2封閉多肽 小鼠αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA Kit
人退行性椎間盤髓核細(xì)胞小鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱：小鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠角膜上皮細(xì)胞英文名稱：小鼠角膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞英文名稱：小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 英文名稱：小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞英文名稱：小鼠晶狀體上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞英文名稱：小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞英文名稱：小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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