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產品名稱：角質細胞無血清培養基

英文名稱：D-KSFM

貨號：BJ-01X10005

產品規格：500ml+1ml（因子）

 

產品特點：

1．本產品是單溶液式細胞增殖與細胞毒性檢測試劑，主要成分包含MTS和一個電子耦合試劑，溶液的穩定性強，反應的靈敏度高。

2．操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時，無需洗滌或收獲細胞，免去溶解步驟。

3．無放射性。不需要配制液閃混合物，也不需要處理廢棄物。

4．與MTT相比，使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。

5．操作靈活，與MTT不同，平板讀數后可放回溫箱繼續孵育，使顏色進一步生成。

儲存條件：低溫運輸，-20℃避光保存，有效期半年。

使用方法:

1. 懸浮細胞，2000rpm離心5min收集細胞;對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短(過長細胞膜破碎，造成假陽性，過短，細胞黏連影響檢測)最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，吸除胰酶消化液，加入細胞培養液終止消化，2000rpm離心5min收集細胞。

2. 4℃預冷PBS，洗滌細胞2次（2000rpm x 5min）,收集細胞2～5×105 。

3. 離心棄上清，加入500μL結合緩沖液，輕輕吹打重懸細胞。

4. 加入5μL Annexin V-FITC，輕輕吹打混勻，加入5μL PI 輕輕吹打混勻,室溫避光孵育5-15min。(PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,時間允許，可以在檢測前5分鐘加入PI)

5. 流式細胞儀檢測或熒光顯微鏡觀察。最好在1h內檢測。

注意事項：

盡管經測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融。

如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。

染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數量增加。

如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗。

熒光物質均易發生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。

用于流式細胞儀檢測時，如果發現Annexin V-FITC單獨染色時出現了過多的PI假陽性細胞，并且通過調整相關設置和參數也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通常可以有效減少假陽性的壞死細胞。

需自備PBS。

本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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