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人小腸平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 10:24:06瀏覽次數(shù):263

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 小腸組織
人小腸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶Hepa 1-6 (小鼠肝癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶兔膀胱成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶RWPE-2 (人前列腺正常細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人小腸平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動的動力,促使食物向下運(yùn)動。小腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結(jié)締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此,體外小腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前提。此外,體外培養(yǎng)細(xì)胞,由于影響因素較為單一,是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

eIF4A1蛋白抗體 核糖核6封閉多肽 

神經(jīng)激肽B抗體 TNF家族B細(xì)胞激活因子封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 二氫嘧啶相關(guān)蛋白5封閉多肽 

G蛋白β5/Gβ 5 抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白25成員A3封閉多肽 

DPRX蛋白抗體 白介1受體1封閉多肽 

磷化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體 膜粘連蛋白A3封閉多肽 

NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體 SYCE1蛋白封閉多肽 

小鼠抗人CD55單克隆抗體 黑色瘤相關(guān)抗原4封閉多肽 

有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體4抗體 胞吐囊復(fù)合體蛋白2封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框152抗體 ALDH3A2封閉多肽 

鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 G蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白2封閉多肽 

人微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 鋅指蛋白83封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體43抗體 轉(zhuǎn)錄因子7樣蛋白1封閉多肽 

整合樣金屬與1型-7( (N端)抗體 DEF8蛋白封閉多肽 

表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體 MAP激相互作用絲氨/蘇氨激2封閉多肽 

結(jié)合球蛋白β抗體 2-二醇脫氫封閉多肽 

連接蛋白JPH3抗體 胱抑SA/半胱氨抑制劑SA封閉多肽 

驅(qū)動蛋白家族成員1C抗體 核孔蛋白GLE1封閉多肽 
人小腸平滑肌細(xì)胞小鼠牙周膜干細(xì)胞培養(yǎng)基-

DMEM無糖 (不含L-、鈉)500mL-

HCT 116細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HCT 116細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HCT 116細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HCT 116細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HCT 116細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SW 1353細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW 1353細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW 1353細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW 1353細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW 1353細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠脾臟單核細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠脾臟單核細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠脾臟單核細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠脾臟單核細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脾臟單核細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠海綿體平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SW480 [SW-480]細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW480 [SW-480]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW480 [SW-480]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW480 [SW-480]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW480 [SW-480]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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