實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產品名稱：原代間質細胞培養(yǎng)體系

產品規(guī)格：100ml/500ml

貨號：BJ-01X1970

保存溫度（℃）：2-8℃/-20℃

運輸溫度（℃）：2-8℃/-20℃

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，*進口來源，*保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

豬二肽肽X (DPP10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1-乙-3-（3-二氨）碳二亞鹽鹽氧化釤 99.99% metals basis對標準溶液 1000μg/ml，溶劑：

豬補體因子I(CFI)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化釤 40nm 球形，99.5%水質亞硝鹽標樣 1.20mg/L，分析標準品

豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞單磷環(huán)己鹽氧化銩 99.9% metals basis濃度范圍:0.421-3.32(mg/L),分析標準品

豬ras同源物因家族成員a(RHOA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒苯酰鋱粉 99.9% metals basis濃度范圍:1.21-3.58(mg/L)，分析標準品

豬核孔蛋白160kda(NUP160)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒苯酰鋱 99.99%水質氮氧化物（水劑）標樣 分析標準品

豬TATA框結合蛋白相關因子1(TAF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聯(lián)苯銩片 99.9% (REO)對硝苯標準溶液 1000μg/ml,溶劑：

豬前列腺素內過氧化物合1(PTGS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙二鹽鹽氧化鐿 99.9% metals basis硝鹽氮標準溶液 500mg/L,不確定度2%

豬間隙連接蛋白26(CX26)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 乙二鹽鹽硫化鋅 4N，靶材水質總有機碳標樣 濃度范圍:（24.4±1.5）mg/l分析標準品

豬角蛋白17(CK17/KRT17)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 乙酰硫化鋅 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder中有機磷農藥混合標樣分析標準品

豬跨膜絲氨蛋白2(TMPRSS2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰2-氟-5- 98%中有機磷農藥混合標樣 分析標準品

豬Pirin蛋白(PIR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒乙酰乙酰苯七氟丁 蛋白質測序分析,99%五苯酚標準溶液776mg/L,溶劑:

豬抗糖蛋白抗體(GP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-苯酰-N-苯羥離子對PIC，用于LC-MS，0.5mol/L 水溶液標準溶液1.35-4.29mg/L,水質分析用

豬凝血因子Ⅶ(F7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  N-苯酰-N-苯羥七氟丁 離子色譜級標準溶液 500mg/L，溶劑：水

豬末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-乙酰苯七氟丁 98%間酚標準溶液 1000μg/ml，溶劑：

豬纖維蛋白肽B(FPB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  4-乙酰苯全氟丁磺  97%對硫標準溶液 500μg/ml，溶劑：

豬中性粒激活蛋白3(NAP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒碳環(huán)己硫鈰,四水 AR，98%中對標樣 分析標準品
原代間質細胞培養(yǎng)體系高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體1,7-雙苯-5-羥-6-庚烯-3- Z-Thr-OH

腺病六鄰體蛋白抗體1,8-桉葉素 Z-β-Ala-OH

高密度脂蛋白結合蛋白抗體1-羥-3,4,5-三氧山（標準品） Z-Glu-OBzl

轉錄因子HNF-3α抗體10-姜酚（標準品） Z-Tyr-OH

熱休克蛋白β7抗體10-羥癸（標準品) Z-Tyr-OMe

E3連接抑制素受體2抗體10-羥癸烯,10-HDA(標準品) Amoxicillin sodium

透明質及粘蛋白3抗體10-羥喜樹(標準品) N-Cbz-D-valine

22號染色體開放閱讀框28抗體10-脫乙酰巴卡亭(標準品) Z-Arg(Mtr)-OH·CHA

14號染色體開放閱讀框94抗體11(α)氧柴胡皂苷F H-Lys(Z)-OMe hydrochloride