產(chǎn)品名稱:DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞
英文名稱:DMEM/F12
貨號(hào):BJ-01X1993
產(chǎn)品規(guī)格:500ml
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),*進(jìn)口來(lái)源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
豬垂體腺苷環(huán)化激活肽受體 (PACAPR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鈉變色硅膠 LR三羥烷 98%
豬激肽釋放6(KLK6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 鈉亞油 95%6-姜烯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90%
豬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒鈉亞油 97%8-姜酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥95%
豬Fas凋亡抑制分子3(FAIM3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉維D3 98%10-姜酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96%
豬皮膚T淋巴相關(guān)抗原(CLA/CTAGE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉麥角固 95%10-姜酚 95%
豬半乳凝集素7(GAL7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2,2’-聯(lián)喹啉-4,4’-二羧鈉麥角固 97%6-姜酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
豬I型膠原交聯(lián)氨端肽(NTXI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 L(-)鈉維D2 98%染料木苷 from Glycine max (soybean), ≥95% (HPLC)
豬磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 L(-)鈉間苯 99%番瀉苷C 99%
豬原卟啉原氧化(PPOX)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒偏釩鈉均苯四酐 96%鉿粒 99.9% metals basis,1-10mm
豬促血管生成素2(ANG2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒偏釩鈉均苯四酐 99%鈮粉 99.5%,200目
豬腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2(ABCG2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 無(wú)水偏釩鈉叔丁硫 99%三溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%
豬ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1元4(ADAMTS4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 無(wú)水偏釩鈉對(duì)叔丁鄰苯二酚 98%代環(huán)己烷 99%
豬白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒無(wú)水偏釩鈉1- ≥99.0% (GC)1,4-二丁烷 98%
豬蛋白S(PROS)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒亞鐵化鈉環(huán)戊烷 Standard for GC,≥99%(GC)六二硅烷 98%
豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒六偏磷鈉環(huán)戊烷 99%(GC)三硅烷 97%
豬表皮角蛋白(EK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 化鈉環(huán)戊烷 96%水中標(biāo)準(zhǔn)溶液100mg/L
DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基細(xì)胞固攜帶蛋白2抗體蝦青素 ASTAXANTHIN(P)Human, Mouse, Rat
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體蝦青素 ASTAXANTHIN(P)Human
碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體APHANIZOPHYLL (SH)Human, Mouse
SHISA蛋白家族9抗體L-(+)-阿拉伯糖 ARABINOSE, L-(+)-(SH)Human, Mouse, Rat
凋亡抑制因子抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse, Rat
外紡錘體樣蛋白1抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse, Rat
磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體ARNIFOLIN(SH)Human, Mouse
抗表面S蛋白抗體氫檳榔 ARECOLINE HYDROBROMIDE(P)Human
突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1丁甜菜乙酯 BUTYROBETAINE ETHYL ESTER CHLORIDE, gamma-(P)Human, Mouse