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兔外周血巨噬細胞

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更新時間:2023-04-21 12:43:39瀏覽次數(shù):277

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
兔外周血巨噬細胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠骨髓巨噬細胞永生化原代細胞永生化1×106雞胚成纖維細胞永生化原代細胞永生化1×106豬主動脈內(nèi)皮細胞永生化原代細胞永生化1×106豬小腸上皮細胞永生化原代細胞永生化1×106雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化原代細胞永生化1×106

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔外周血巨噬細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應(yīng)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  巨噬細胞樣

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

SNRNP200蛋白抗體 磷化堿性成纖維細胞生長因子受體1封閉多肽 小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

甲基化組蛋白H3(tri methyl K4)單克隆抗體 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3封閉多肽 小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒ELISA

組蛋白去乙酰化9抗體 含丙氨酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1封閉多肽 小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: ACE2 內(nèi)皮細胞纖溶原激活抑制蛋白1封閉多肽 小鼠αL巖藻糖苷(AFU)elisa試劑盒

腫瘤細胞調(diào)亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 線粒體釋放因子1樣蛋白封閉多肽 小鼠血管舒緩激肽(BK)試劑盒elisa

半乳糖凝集3抗體 肌鈣蛋白C2封閉多肽 小鼠胰島原(PI)檢測試劑盒elisa

G蛋白偶聯(lián)受體GPR91蛋白抗體 谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成封閉多肽 小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體 棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ封閉多肽 小鼠抗IVIgG抗體試劑盒ELISA

磷脂磷2b抗體 金屬硫蛋白3封閉多肽 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒

RUSC1抗體 磷化非受體型酪氨蛋白激Tnk1封閉多肽 小鼠銅藍蛋白(CP/CER)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體 MDM1蛋白封閉多肽 小鼠p53(p53)試劑盒elisa

PLEKHA7蛋白抗體 單鏈DNA結(jié)合蛋白2封閉多肽 小鼠環(huán)磷鳥苷(cGMP)檢測試劑盒elisa

PSMα7抗體 CD101封閉多肽 小鼠一氧化氮合成(NOS)ELISA試劑盒

核糖體p70 S6蛋白激抗體 促分裂原誘導(dǎo)基因6蛋白/Mig-6封閉多肽 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)試劑盒ELISA

磷化組蛋白去乙酰化5抗體 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1封閉多肽 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)ELISA檢測試劑盒

細胞分裂周期相關(guān)蛋白5抗體 核轉(zhuǎn)錄因子SOX14封閉多肽 小鼠組胺(HIS)elisa試劑盒

肝血管生成相關(guān)蛋白4抗體 間隙連接蛋白37封閉多肽 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)試劑盒elisa

溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白RER1封閉多肽 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測試劑盒elisa
兔外周血巨噬細胞HCC827人非小肺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827細胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC827人非小肺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827細胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC827+LUC人非小肺癌熒光標(biāo)記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827+LUC細胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC827+LUC人非小肺癌熒光標(biāo)記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC827+LUC細胞專用培養(yǎng)基500ML

HCC-94人子宮鱗癌(高分化) 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC-94細胞專用培養(yǎng)基125ML

HCC-94人子宮鱗癌(高分化) 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HCC-94細胞專用培養(yǎng)基500ML

hccc-9810人膽管型肝癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:hccc-9810細胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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