詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:中國倉鼠卵巢細(xì)胞k1 亞克隆系
產(chǎn)品英文:CHO-K1細(xì)胞
貨號(hào):BJ-01X1735
細(xì)胞培養(yǎng)條件:F12K+10%FBS+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
核孔蛋白50kda(NUP50)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硫巴龍霉素柱層層析硅膠 100-180目 88-150um甜菊苷 80%
核孔蛋白85kda(NUP85)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硫巴龍霉素柱層層析硅膠 100-200目 75-150um1-Boc-哌 98%
核孔蛋白98kda(NUP98)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒井岡霉素柱層層析硅膠 160-200目 75-98um3-環(huán)己烯-1- 98%
核受體相互作用蛋白1(NRIP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒井岡霉素柱層層析硅膠 200-300目 54-75um1,2-環(huán)己烷二二縮水甘油酯 90%
核糖核A3(RNASE3/ECP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒井岡霉素柱層層析硅膠 230-400目 38-54um三縮水甘油對(duì)氨苯酚 90%
核糖核H(RNASEH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝益康唑柱層層析硅膠 300-400目 37-54um9,10-二氫-9-氧雜-10-磷雜菲-10-氧化物 97%
核糖核T2(RNASET2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝益康唑柱層層析硅膠 400-800目 15-38um3-乙-3-氧雜丁環(huán) 96%
核糖核抑制因子(RI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝唑柱層層析硅膠 400-800目 15-31um3,4-環(huán)氧環(huán)己-3,4-環(huán)氧環(huán)己酯
核糖核(RNASE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 硝唑蘭膠指示劑 變色硅膠 2~5mm3,5-二庚 98%
核糖體蛋白L10(RPL10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒硝唑200×200mm HF254型號(hào) N,N,N,N,-四環(huán)氧-4,4-二氨二苯
核糖體蛋白L26(RPL26)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒諾氟沙星200×200mm GF254型號(hào)4-乙烯環(huán)氧環(huán)己烷 98%
核因子κB (NFκB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒諾氟沙星200×200mm H型號(hào)溴化銫 99.5%
核因子κB受體激活因子配(RANκL)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒諾氟沙星200×200mm G型號(hào)溴化銫 99.9% metals basis
核因子κB亞p65(NF-κB p65)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒恩諾沙星100×200mm HF254型號(hào)硝銫 99.99%
黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒恩諾沙星100×200mm GF254型號(hào)硫銫 AR,99.5%
黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒恩諾沙星100×200mm H型號(hào)硫銫 99.9%
CHO-K1細(xì)胞雌激素反應(yīng)鋅指蛋白抗體斑蝥素 CANTHARIDIN(P)Human, Mouse, Rat
TWIST蛋白2抗體抗體斑蝥素 CANTHARIDIN(P)Human, Mouse, Rat
磷化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體斑蝥素 CANTHARIDIN(P)Human, Mouse, Rat
磷化端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體斑蝥素 CANTHARIDIN(RG)Human, Mouse, Rat
磷化結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體角黃素 CANTHAXANTHIN(AS)Human, Mouse
磷化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體角黃素 10% CANTHAXANTHIN 10%(RG)Human, Mouse, Rat
磷化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體CONVOLVAMINE HYDROCHLORIDE(RG)Human, Mouse
磷化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體CONVOLVAMINE HYDROCHLORIDE(RG)Human, Mouse, Rat
磷化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體(±)-菊 CHRYSANTHEMYL ALCOHOL(RG)Human, Mouse, Rat