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兔尿道平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 08:40:57瀏覽次數:233

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 尿道組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

兔尿道平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

尿道組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。起自膀胱的尿道內口,止于尿道外口,行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部,尿道在尿道膜部有一環橫行紋肌構成的括約肌,稱為尿道外括約肌,由意識控制。尿道有三個解剖上的較狹部和膨大部,前者分別位于外口、膜部和內口,后者位于舟狀窩、球部和前列腺部。尿道壁為粘膜層、粘膜下層和肌肉層所組成。在前尿道的外面,還包有豐富的彈力纖維和平滑肌纖維的尿道海綿體。尿道粘膜上皮在前列腺部為移行上皮(近膀胱部),一部分為多列或復層柱狀上皮,在有尿道海綿體的一部分尿道,主要為復層柱狀上皮,在皺襞上也有單層柱狀上皮。特別在舟狀窩內有許多環狀細胞,舟狀窩的遠端部開始有未角化的復層鱗狀上皮。粘膜下層血液供應豐富,主要為結締組織。肌肉層有縱行肌和外環形肌。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過平滑肌細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

微管蛋白δ1/δ Tubulin抗體 乙型肝炎病毒X蛋白 (HBX) 封閉多肽 

γ氨基丁受體相關蛋白樣3抗體 STRN4蛋白封閉多肽 

泛羧基末端水解5單克隆抗體 同源盒蛋白HOXC9封閉多肽 

磷化血小板源性生長因子受體-B抗體 NK細胞抑制性受體2DL2封閉多肽 

成熟T淋巴細胞增殖蛋白1抗體 轉錄因子同源框蛋白SIX2封閉多肽 

絲氨55抗體 HRAS樣抑制因子2封閉多肽 

10號染色體開放閱讀框30抗體 腫瘤抑制基因NME2封閉多肽 

晶狀體蛋白ζ抗體 溶體相關膜蛋白3封閉多肽 

磷羧化2抗體 細胞色P450ⅡJ2封閉多肽 

白介-1受體相關激2抗體 抗酒石性磷5型/5型性磷封閉多肽 

英文名稱: NGAL 20號染色體開放閱讀框118封閉多肽 

TOX3蛋白抗體 MOSPD3蛋白封閉多肽 

酪氨激受體C單克隆抗體 血影蛋白A鏈非紅細胞型封閉多肽 

5-羥色胺受體3抗體 磷化P27封閉多肽/周期依賴激抑制劑封閉多肽 

ZDBF2蛋白抗體 纖溶原激活物抑制劑1 RNA結合蛋白封閉多肽 

CpG結合蛋白抗體 原始廣泛存在蛋白1封閉多肽 

細胞分裂周期樣激3抗體 晶狀體蛋白λ封閉多肽 

CD79A抗體 細胞色B5還原樣蛋白封閉多肽 
兔尿道平滑肌細胞小鼠棕色脂肪干細胞培養基100mL小鼠棕色脂肪干細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠棕色脂肪干細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠棕色脂肪干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠棕色脂肪干細胞的體外培養。

8305C細胞專用培養基125mL×48305C細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持8305C細胞佳的生長狀態。本產品中已包含8305C細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于8305C細胞的體外培養。

小鼠外周血白細胞培養基100mL小鼠外周血白細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠外周血白細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠外周血白細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血白細胞的體外培養。

兔骨骼肌細胞培養基100mL兔骨骼肌細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔骨骼肌細胞佳的生長狀態。本產品中已包含兔骨骼肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骨骼肌細胞的體外培養。

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小鼠關節軟骨細胞培養基100mL小鼠關節軟骨細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持小鼠關節軟骨細胞佳的生長狀態。本產品中已包含小鼠關節軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠關節軟骨細胞的體外培養。

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