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人鼻黏膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 13:08:01瀏覽次數:283

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 0.2ml/200μg
貨號 BJ-YK1892 主要用途 科研實驗
組織來源 鼻黏膜組織    
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人鼻黏膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

鼻黏膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自鼻黏膜組織;黏膜是覆蓋在人體內消化、呼吸、泌尿、生殖等器官管腔內壁的一層組織結構,由上皮組織和疏松結締組織構成。根據部位不同,有口腔黏膜、胃腸黏膜、鼻腔黏膜、氣管黏膜、陰道黏膜、眼瞼黏膜等不同名稱。它們的結構也因功能、部位不一而不盡相同。鼻腔黏膜,簡稱鼻黏膜,覆蓋于鼻腔表面,黏膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。成纖維細胞是結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過成纖維細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

絲氨蘇氨激1受體相互作用蛋白抗體 溶血磷脂1封閉多肽 大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒

結蛋白抗體 泛激1封閉多肽 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒ELISA

骨保護蛋白配體/破骨細胞分化因子抗體 褪黑激相關受體封閉多肽 大鼠膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA檢測試劑盒

CD3D抗體 激肽釋放15封閉多肽 大鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)elisa試劑盒

蛋白激C亞性D型抗體 抑癌基因5封閉多肽 大鼠纖連蛋白(FN)試劑盒elisa

促進調解蛋白家族2A抗體 肌動蛋白結合蛋白2B封閉多肽 大鼠睫狀神經營養因子(CNTF)檢測試劑盒elisa

α1抗體 生長激誘導跨膜蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒

英文名稱: PDPK1 內著絲粒蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒ELISA

磷化細胞凋亡信號調節激1抗體 C-SKI封閉多肽 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測試劑盒

F-box蛋白家族FBXO31抗體 整合alpha E2 封閉多肽 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa試劑盒

即刻早期基因ARC抗體 小腸型脂肪結合蛋白封閉多肽 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒elisa

Complexin I/復合1抗體 肝細胞粘附分子2封閉多肽 大鼠腦源性神經營養因子(BDNF)檢測試劑盒elisa

eIF2Bγ單克隆抗體 磷化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)封閉多肽 大鼠活化A(ACV-A)ELISA試劑盒

BXDC2蛋白抗體 周期依賴性激1封閉多肽 大鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒ELISA

髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 胞漿亮氨tRNA連接封閉多肽 大鼠血管緊張轉化(ACE)ELISA檢測試劑盒

FITC標記小鼠抗人CD22單克隆抗體 腺苷單磷活化蛋白激α1封閉多肽 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒

轉錄因子HES-1抗體 蛋白賴氨-6-氧化封閉多肽 大鼠巨噬細胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒elisa

細胞核因子/k基因結合核因子單克隆抗體 磷化細胞核因子NF-κB p65封閉多肽 裸鼠環加氧2(COX-2)檢測試劑盒elisa
人鼻黏膜成纖維細胞NCI-H1944人肺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H1944細胞專用培養基125ML

NCI-H1944人肺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H1944細胞專用培養基500ML

NCI-H1975人肺腺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H1975細胞專用培養基125ML

NCI-H1975人肺腺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H1975細胞專用培養基500ML

NCI-H2126人肺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H2126細胞專用培養基125ML

NCI-H2126人肺癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H2126細胞專用培養基500ML

NCI-H226人肺鱗癌細胞專用培養基英文名稱:NCI-H226細胞專用培養基125ML

 


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