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小鼠腦成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 15:03:21瀏覽次數:288

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
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詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

小鼠腦成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

BCL2相互作用蛋白質抗體 嗅覺受體5M11封閉多肽 小鼠紅細胞生成(EPO)ELISA檢測試劑盒

單核巨噬細胞分化相關蛋白2抗體 二胺乙酰基轉移1封閉多肽 小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E) ELISA Kit

英文名稱: streptomycin 磷化腫瘤抑制基因P53封閉多肽 小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒

英文名稱: Fatty Acid Synthase 磷化蛋白磷激PKC/CPI-17封閉多肽 小鼠Slit2  試劑盒 ELISA

卷曲螺旋結構域蛋白28B抗體 磷化胞吞再循環相關銜接蛋白CENTB1封閉多肽 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42) ELISA檢測試劑盒

成纖維細胞生長因子11抗體 同源盒蛋白轉錄因子EN2封閉多肽 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG) ELISA Kit

平滑肌細胞相關蛋白4抗體 鋅指蛋白738封閉多肽 小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra) ELISA試劑盒

FAM189A1蛋白抗體 蝶呤甲醇胺脫水1封閉多肽 小鼠降鈣原(PCT) 試劑盒 ELISA

1號染色體開放閱讀框64抗體 微管相關絲氨/蘇氨激1封閉多肽 小鼠胰島自身抗體(IAA)ELISA檢測試劑盒

同源盒蛋白C11抗體 胎盤特異蛋白1封閉多肽 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210) ELISA Kit

SKIP蛋白抗體 角蛋白相關蛋白10-2封閉多肽 小鼠白介7(IL-7) ELISA試劑盒

甲基化CpG結合蛋白MBD6抗體 轉錄調節因子C/EBP α 封閉多肽 小鼠褪黑(MT) 試劑盒 ELISA

磷酯3蛋白抗體 DNAJC21蛋白封閉多肽 小鼠載脂蛋白H(Apo-H) ELISA檢測試劑盒

親環蛋白PPIB抗體 膜相關蛋白樣蛋白NUMBL封閉多肽 小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA Kit

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小鼠腦成纖維細胞小鼠膈肌細胞英文名稱:小鼠膈肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠肌腱成纖維細胞英文名稱:小鼠肌腱成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠皮下微血管內皮細胞英文名稱:小鼠皮下微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠脂肪細胞英文名稱:小鼠脂肪細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠椎體終板軟骨細胞英文名稱:小鼠椎體終板軟骨細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠骨骼肌微血管內皮細胞英文名稱:小鼠骨骼肌微血管內皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠耳軟骨細胞英文名稱:小鼠耳軟骨細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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