詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品名稱:斑馬魚胚胎成纖維細胞
產品英文:pac2細胞
貨號:BJ-01X1757
細胞培養(yǎng)條件:L15+10%FBS+1%P/S 28℃培養(yǎng)
生長狀態(tài):貼壁生長
產品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃)28℃
運輸溫度(℃):常溫
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
黏著斑激(FAK)聯免疫吸附測定試劑盒 尿嘧啶仲丁苯 99%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
鳥氨氨酰轉移(OCT)聯免疫吸附測定試劑盒尿嘧啶苯丁 99%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
鳥氨脫羧(ODC)聯免疫吸附測定試劑盒尿苷4-溴苯苯 97%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
鳥苷交換因子(GEF)聯免疫吸附測定試劑盒 尿苷4-溴-4',4''-二三苯 95%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
鳥苷結合蛋白4(GBP4)聯免疫吸附測定試劑盒 尿苷2-叔丁蒽醌 98%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
孕激素誘導阻斷因子(PIBF)聯免疫吸附測定試劑盒尿苷N,N'-雙(3-氨)乙二 97%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
尿苷二磷葡萄糖神經酰葡萄糖轉移(UGCG)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷一磷己二二異辛酯 99%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷一磷苯磺 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽N'N-雙(3-氨) 98%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
尿素相關蛋白C(UreC)聯免疫吸附測定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽溴鄰苯三酚紅 Indicator豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
內皮素受體B(ETRB)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷一磷二鈉鹽(S)-(-)-2- 99%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
凝溶膠蛋白(GS)聯免疫吸附測定試劑盒 5-尿苷一磷二鈉鹽乙叔丁 97%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
凝血(TM)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷二磷3,4-苯并芘 96%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
凝血/抗凝血復合物(TAT)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷二磷2- 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
凝血敏感蛋白1(TSP1)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷二磷仲丁 97%豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
凝血受體(TR)聯免疫吸附測定試劑盒5-尿苷二磷二鈉鹽2-(2-溴乙)-1,3-二惡烷 98%豐度:10atom%;化學純度:≥98.5%
pac2細胞大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽辣椒,辣椒素(天然提取標準品)Human, Mouse
人白三烯D4辣蓼(標準品)Human
小鼠抗核抗體萊苞迪甙A(標準品)Human, Mouse, Rat
兔抑瘤素M萊苞迪甙C(標準品)Human
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白萊苞迪甙D(標準品)Human, Mouse
大鼠解整合素樣金屬蛋白9萊苞迪苷GHuman, Mouse
人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白萊菔子(標準品)Human, Mouse, Rat
植物血凝素蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標準品)Human
小鼠解整合素樣金屬蛋白9藍布正(標準品)Human, Mouse, Rat