詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱:食管平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格:5×105
貨號:BJ-01X1792
產(chǎn)品類型:原代細胞
單位:T25/瓶
提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運輸溫度(℃):常溫
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,公司產(chǎn)品僅用于科研由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
花生四烯-15-脂加氧B(ALOX15B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 酚酞芥酯 分析標準品磷氫二鈉,無水 CP,98%
V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病癌因同源物B (RELB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞絡合指示劑8-氧補骨脂素 分析標準品,≥98%磷氫二鈉,無水 PT
白介素24 (IL-24)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒酚酞絡合指示劑中 分析標準品,≥98%磷氫二鈉,無水 SP
黑素瘤缺乏因子2(AIM2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒麝香草酚神經(jīng) 分析標準品,≥99.0% (GC)磷氫二鈉,無水 99.99% metals basis
CD63/四旋蛋白30 (TSPAN30/CD63)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒羅丹明123反式-9-十八烯酯 分析標準品磷氫二鈉,十二水 AR,99%
BTG3關聯(lián)核蛋白(BANP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒羅丹明123千層紙素A 分析標準品,≥98%磷氫二鈉,十二水 CP,98%
cGMP依賴性蛋白激I (PRKG1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒羅丹明B巖芹 分析標準品,>99%(GC)磷氫二鈉,十二水 GR,99%
磷二酯4D(PDE4D)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒羅丹明B百秋李 分析標準品,>98%磷氫二鈉,十二水 ACS,98.0-102.0%
腦型肌激(CKB)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 羅丹明B蓖麻油 分析標準品,99%無水磷三鈉 AR
抗肝微粒體抗體(Anti-LKM-1 IgG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯蓖麻油 >97.0%(T),>70%(GC)磷氫二鈉,無水 或昆蟲培養(yǎng), ≥99%
賴氨酰氧化樣蛋白4(LOXL4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯丹酚A 分析標準品,≥98%磷氫二鈉,無水 電泳級, ≥99%
腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯紫草素 分析標準品,≥97%磷氫二鈉,無水 分子生物學級,≥99.5% (T)
抗環(huán)胍氨肽抗體(ACCPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯雷公藤素 分析標準品,≥98%磷二氫鋅 SU
殺菌肽LL-37(LL-37)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯鹽鹽水合物雷公藤素 98%磷鋅 AR
胸腺肽α1(Tα1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3,3,5,5-四聯(lián)苯鹽鹽水合物毛蕊花糖苷 分析標準品磷鋅 CP,99.0%
早老素1(PS1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3,3,5,5-四聯(lián)苯鹽鹽水合物11-順-十八碳烯 分析標準品3-肼鹽鹽 98%
食管平滑肌細胞大鼠尿激型纖溶原激活物大黃(掌葉大黃)(標準品)Human, Mouse, Rat
大鼠尿激型纖溶原激活物受體大黃(藥用大黃)(標準品)Human, Mouse, Rat
人乙型肝炎表面抗原大黃酚(標準品)Human, Mouse
人抗乙型肝炎病核心抗體大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標準品)Human
大鼠白介素12大黃素(標準品)Human
人抗乙型肝炎病核心IgM抗體大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)Human, Mouse, Rat
大鼠血管內(nèi)皮生長因子B大黃素(標準品)Human
人抗乙型肝炎病表面抗體大黃Human, Mouse, Rat
大鼠白介素12大黃(標準品)Human, Mouse, Rat