詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:吳茱萸染料法PCR鑒定試劑盒圖片
英文名稱:Fructus evodiae
編號(hào):BJ-P988051
分類:鑒定試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
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PCR的優(yōu)點(diǎn):
特異性好,使用特異性探針對(duì)定量分子進(jìn)行識(shí)別,具有很高的準(zhǔn)確性。
同時(shí),靶序列由引物和探針雙重控制,假陽性低。
靈敏度高,Real-time qPCR技術(shù)是綜合了PCR技術(shù)、熒光標(biāo)記技術(shù)、激光技術(shù)、數(shù)碼顯像技術(shù)為一體的技術(shù),因此它的檢測(cè)靈敏度很高。
準(zhǔn)確性高、檢測(cè)范圍寬,由于熒光信號(hào)的產(chǎn)生和每次擴(kuò)增產(chǎn)物成線性對(duì)應(yīng)的關(guān)系,通過熒光信號(hào)的檢測(cè)可以直接對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定量;定量范圍可在0-1010拷貝/毫升。
操作簡(jiǎn)單、安全、無污染,擴(kuò)增和檢測(cè)可以在同一管內(nèi)進(jìn)行,不需要開蓋,不易污染,同時(shí)擴(kuò)增和檢測(cè)一步完成,不需要后期處理,不再需要擔(dān)心放射性污染。
速度快、通量高,可在2-3小時(shí)內(nèi)完成96個(gè)樣品的定量分析。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí),最大吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時(shí)的最大吸收光譜在 500nm,最大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
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肽聚糖識(shí)別蛋白1(PGLYRP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SCARA5 ELISA Kit包裝5g
17-β-羥基類固脫氫酶3(HSD17β3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SCN2B ELISA Kit包裝100g
C-Raf原癌基因絲蘇氨酸蛋白激酶(CRAF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SCARF1 ELISA Kit包裝25g
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前膠原C端蛋白酶增強(qiáng)子1(PCPE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SCCPDH ELISA Kit包裝1g
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血小板反應(yīng)蛋白4(THBS4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SCEL ELISA Kit包裝5g
轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員1(TRPV1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SART3 ELISA Kit包裝1g
早幼粒白血病蛋白(PML)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SAT2 ELISA Kit包裝250mg
胱硫γ裂解酶(CSE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human SAMM50 ELISA Kit包裝25g
吳茱萸染料法PCR鑒定試劑盒圖片鞘氨盒菌屬Human ACCS (1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase-like protein 1) ELISA KIT拉丁屬名: Sphingopyxis wooponensis
菌核曲霉Human SREBF2(Sterol regulatory element-binding protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus scleroriorum
茄勞爾氏菌Human ABHD12 (Monoacylglycerol lipase ABHD12) ELISA KIT僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
尖鐮孢Human ASCL1 (Achaete-scute homolog 1) ELISA KIT拉丁屬名: Fusarium oxysporum Schlechtendal
阪崎克羅諾桿菌Human ABRA (Actin-binding Rho-activating protein) ELISA KIT拉丁屬名: Cronobacter sakazakii
金耳Human HTR1D (5-hydroxytryptamine receptor 1D) ELISA KIT拉丁屬名: Tremella aurantialba Bandoni
解葡聚糖類芽胞桿菌Human ACTL9 (Actin-like protein 9) ELISA KIT拉丁屬名: Paenibacillus glucanolyticus
美澳型核果褐腐病菌Human ACTL8 (Actin-like protein 8) ELISA KIT僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
單增李斯特氏菌Human HTR2A (5-hydroxytryptamine receptor 2A) ELISA KIT拉丁屬名: Listeria monocytogenes