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雞卵泡顆粒細胞

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更新時間:2023-04-20 21:01:21瀏覽次數:221

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 雞卵泡組織
雞卵泡顆粒細胞的相關產品:大鼠肝竇內皮細胞大鼠肝動脈平滑肌細胞大鼠肝動脈內皮細胞大鼠腹腔巨噬細胞大鼠腹膜間皮細胞大鼠肺血管平滑肌細胞大鼠肺微血管內皮細胞大鼠肺泡巨噬細胞大鼠肺動脈成纖維細胞

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱規格組織來源
雞卵泡顆粒細胞5×105cells/T25細胞培養瓶雞卵泡組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔,內膜細胞呈多邊形,胞質清亮,胞核圓形,細胞間可見許多毛細血管,外膜細胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時,周圍的菱形細胞變為立方形,并由單層增生成復層,因其細胞漿內含有顆粒,故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級卵泡的顆粒細胞增至復層;成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為單層。顆粒細胞的胞核大而圓,著色深,細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。

5.方法簡介:

實驗室分離采用先機械分離后膠原酶 - 聯合消化法、并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離經FSHR免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基    含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性    貼壁

細胞形態    上皮細胞樣

傳代特性    可傳1代

消化液    0.25%

培養條件    氣相:空氣,95%;CO2,5%

體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:二、免疫熒光鑒定:

   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?br/>    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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PCX足細胞標記蛋白/足盂蛋白ELISA試劑盒    PCX ELISA Kit    48T/96T

HIS組胺ELISA試劑盒    HIS ELISA Kit     48T/96T

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SETD7組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶SETD7ELISA試劑盒    SETD7 ELISA Kit    48T/96T

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HDAC3組蛋白去乙酰化酶3ELISA試劑盒    HDAC3 Elisa kit    48T/96T

HDAC2組蛋白脫乙?;?ELISA試劑盒    HDAC2 ELISA Kit    48T/96T

HAT組蛋白乙?;窫LISA試劑盒    HAT ELISA Kit    48T/96T

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CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒    Cathepsin L1 ELISA Kit    48T/96T

Cath Ab組織蛋白酶抗體ELISA試劑盒    Cath Ab ELISA Kit    48T/96T

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