詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 組織來源 |
雞卵泡顆粒細胞 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 雞卵泡組織 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔,內膜細胞呈多邊形,胞質清亮,胞核圓形,細胞間可見許多毛細血管,外膜細胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時,周圍的菱形細胞變為立方形,并由單層增生成復層,因其細胞漿內含有顆粒,故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級卵泡的顆粒細胞增至復層;成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為單層。顆粒細胞的胞核大而圓,著色深,細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。
5.方法簡介:
實驗室分離采用先機械分離后膠原酶 - 聯合消化法、并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:
實驗室分離經FSHR免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
實驗報告:
一、分離與培養: | 二、免疫熒光鑒定: |
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?br/> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
tPSA總前列腺特異抗原ELISA試劑盒 tPSA ELISA Kit 48T/96T
PCX足細胞標記蛋白/足盂蛋白ELISA試劑盒 PCX ELISA Kit 48T/96T
HIS組胺ELISA試劑盒 HIS ELISA Kit 48T/96T
H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B組蛋白H3.3ELISA試劑盒 Histone H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA kit 48T/96T
SETD7組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶SETD7ELISA試劑盒 SETD7 ELISA Kit 48T/96T
HDAC組蛋白去乙?;窫LISA試劑盒 HDAC ELISA Kit 48T/96T
HDAC3組蛋白去乙酰化酶3ELISA試劑盒 HDAC3 Elisa kit 48T/96T
HDAC2組蛋白脫乙?;?ELISA試劑盒 HDAC2 ELISA Kit 48T/96T
HAT組蛋白乙?;窫LISA試劑盒 HAT ELISA Kit 48T/96T
CTSC組織蛋白酶CELISA試劑盒 CTSC ELISA Kit 48T/96T
Cath G Ab組織蛋白酶G自身抗體ELISA試劑盒 Cath G Ab ELISA Kit 48T/96T
CTSH組織蛋白酶HELISA試劑盒 CTSH ELISA kit 48T/96T
CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒 Cathepsin L1 ELISA Kit 48T/96T
Cath Ab組織蛋白酶抗體ELISA試劑盒 Cath Ab ELISA Kit 48T/96T
HD組織蛋白去乙?;窫LISA試劑盒 HD ELISA Kit 48T/96T
大鼠肺大動脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠肺成纖維細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
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大鼠大隱靜脈平滑肌細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠大隱靜脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
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大鼠腸微血管內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠腸神經嵴干細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠腸平滑肌細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
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大鼠腸靜脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
雞卵泡顆粒細胞大鼠腸動脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠腸道干細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠表皮角質形成細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶
大鼠表皮角化細胞 5×10^5Cells/T25培養瓶