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人肺大動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 16:37:59瀏覽次數:222

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×105cells/T25細胞培養瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺動脈組織
人肺大動脈平滑肌細胞的相關產品:小鼠神經干細胞原代細胞5×105小鼠腦血管成纖維細胞原代細胞5×105小鼠DRG神經元細胞原代細胞5×105小鼠下丘腦神經元細胞原代細胞5×105小鼠背根神經節細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺大動脈組織;肺大動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經肺門入肺。肺動脈干位于心包內,為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。肺大動脈平滑肌細胞是肺血管的重要結構細胞之一,在調控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺大動脈平滑肌細胞的異常是肺動脈高壓發生發展的重要病理學特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,推斷缺氧可能是通過促進肺大動脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發生發展。肺大動脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺大動脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態佳

消化液  0.25%胰dan白

培養條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產品屬性:

產品名稱

規格

組織來源

人肺大動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養瓶

肺動脈組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養:

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
   5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 羅丹明標記鏈霉親和 

微管相關蛋白2單克隆抗體 ZFY19封閉多肽 

突觸結合蛋白10抗體 20號染色體開放閱讀框187封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 血管抑制蛋白1封閉多肽 

磷化腫瘤轉移抑制基因GDIA1抗體 CD2封閉多肽 

表皮生長因子樣激受體1(EMR1)抗體 肌微管相關蛋白1封閉多肽 

細胞色P450 2F1抗體 DZANK1蛋白封閉多肽 

鴨甲型肝炎病毒聚蛋白/鴨肝炎病毒抗體 鋅指蛋白8封閉多肽 

磷化染色質相關蛋白1-γ抗體 基質重塑相關蛋白5封閉多肽 

神經元3抗體 3-磷甘油醛脫氫 

神經突起生長誘導因子受體UNC5C抗體 多聚磷肌醇磷1封閉多肽 

肝細胞生長因子β抗體 富含半胱氨蛋白質MIG7封閉多肽 

磷化腫瘤血管內皮標志物8抗體 磷化RET原癌基因封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激蛋白抗體 G蛋白偶聯受體54封閉多肽 

Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體 白喉酰胺生物合成樣蛋白2封閉多肽 

谷氧還蛋白5抗體 粘合連接相關蛋白1封閉多肽 

轉移生長因子β受體1抗體 重組小鼠表皮膜蛋白1 

HERPUD蛋白家族成員2抗體 Alexa Fluor 488標記牛血清白蛋白 
人肺大動脈平滑肌細胞NCI-H929細胞專用培養基125mL×4NCI-H929細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NCI-H929細胞佳的生長狀態。本產品中已包含NCI-H929細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H929細胞的體外培養。

SMC-1細胞專用培養基125mL×4SMC-1細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持SMC-1細胞佳的生長狀態。本產品中已包含SMC-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SMC-1細胞的體外培養。

NRK細胞專用培養基125mL×4NRK細胞專用培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持NRK細胞佳的生長狀態。本產品中已包含NRK細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NRK細胞的體外培養。

大鼠主動脈外膜成纖維細胞培養基100mL大鼠主動脈外膜成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠主動脈外膜成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠主動脈外膜成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠主動脈外膜成纖維細胞的體外培養。

大鼠神經少突膠質前體細胞培養基100mL大鼠神經少突膠質前體細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持大鼠神經少突膠質前體細胞佳的生長狀態。本產品中已包含大鼠神經少突膠質前體細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠神經少突膠質前體細胞的體外培養。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

RPMI-1640(ATCC改良)500mL-

人乳腺癌成纖維細胞培養基100mL人乳腺癌成纖維細胞培養基由技術團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持人乳腺癌成纖維細胞佳的生長狀態。本產品中已包含人乳腺癌成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人乳腺癌成纖維細胞的體外培養。
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基,90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 


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