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大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:44:46瀏覽次數(shù):151

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔大隱靜脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔腎動脈平滑肌細胞原代細胞5×105兔腎動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔胸主動脈平滑肌細胞原代細胞5×105兔食管上皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

肌肉特定環(huán)指蛋白3抗體 激肽釋放9封閉多肽(舒血管9) 

INE1蛋白抗體 ATP5E蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白580抗體 LRIG1封閉多肽 

神經(jīng)絲蛋白抗體 異染色體同源蛋白1封閉多肽 

/磷二酯家族成員5抗體 DNAJC30蛋白封閉多肽 

內(nèi)皮-1單克隆抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

英文名稱: VAV3 Alexa Fluor 555 標(biāo)記 

蛋白磷酯-1B抗體 纖維鞘相互作用蛋白2封閉多肽 

角蛋白相關(guān)蛋白KAP3.3抗體 溶質(zhì)載體家族13成員1封閉多肽 

P38相互作用蛋白抗體 絲氨14/膜型絲氨1封閉多肽 

組蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白3抗體 信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1封閉多肽 

肌球蛋白輕鏈激家庭成員4抗體 纖維連接蛋白/Ugl-Y3封閉多肽 

錨蛋白重復(fù)域54抗體 腦蛋白絲氨/蘇氨激29封閉多肽 

鉬輔因子合成蛋白3抗體 重組人胱抑C蛋白 

SC5DL蛋白抗體 CD169封閉多肽 

7型膠原抗體 泛蛋白連接E3封閉多肽 

ras基因相關(guān)蛋白RAB5C抗體 鉀離子通道蛋白家族成員3封閉多肽 

鈉離子通道調(diào)節(jié)蛋白1抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白25封閉多肽 
大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞人椎間盤髓核細胞培養(yǎng)基100mL人椎間盤髓核細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人椎間盤髓核細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人椎間盤髓核細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人椎間盤髓核細胞的體外培養(yǎng)。

人皮膚癌組織源細胞培養(yǎng)基100mL人皮膚癌組織源細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人皮膚癌組織源細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人皮膚癌組織源細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人皮膚癌組織源細胞的體外培養(yǎng)。

RL1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4RL1細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RL1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RL1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RL1細胞的體外培養(yǎng)。

人卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基100mL人卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人卵巢成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人卵巢成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人卵巢成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

MET-5A細胞專用培養(yǎng)基125mL×4MET-5A細胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MET-5A細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MET-5A細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MET-5A細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

SU-DHL-4細胞專用培養(yǎng)基125mL×4SU-DHL-4細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SU-DHL-4細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SU-DHL-4細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SU-DHL-4細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

MEM (不含L-,含雙抗)500mL-


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