使用方法
1. 提取液制備:
每1000ul預冷的蛋白提取液A中加入4ul蛋白酶抑制劑混合物,充分混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本,用刀盡可能剪碎,然后加入500ul提取液A后用勻漿機/勻漿器充分勻漿。
3. 將勻漿液用100um細胞篩過濾。
4. 將濾液在200×g條件下離心3分鐘,棄沉淀,收集上清。
5. 將上清在4℃,800×g力條件下離心5分鐘。
6. 棄沉淀,將上清(I)移入另一干凈的離心管。
7. 在上清(I)中加入50ul胞質提取液B,高速渦旋振蕩15秒,充分混勻。
8. 在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
9. 在4℃,12000×g條件下離心10分鐘。
10. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管,即得到細胞質蛋白。
11. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。