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增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
  • 增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
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更新時間:2024-08-19 21:00:06

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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 增強型ECL試劑盒采用高品質(zhì)進口原料,經(jīng)大量樣本實驗驗證優(yōu)化配方。穩(wěn)定性高,檢測方便,可檢測pg級的抗原。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.長期不用-20℃儲存。
2.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
儀器準備
1.移液器
2.冰箱
3.冰盒
試劑準備
純水
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
1.ECL工作液配制過程中吸取試劑A和試劑B時務(wù)必跟換吸頭,工作液新鮮配制后立即使用,放置過久會影響靈敏度。
2.根據(jù)蛋白豐度不同曝光時間可能是數(shù)秒至數(shù)小時。
3.曝光時間過長會使背景加深,曝光不足會導(dǎo)致條帶模糊。
4.如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5.必須使用高質(zhì)量保鮮膜。
使用方法

1. 使用合適的方法進行 Western,直至用PBST洗滌二抗。
2. 配制新鮮ECL工作液:試劑A和試劑B按1:1混合均勻后即為ECL工作液。
3. 印跡膜蛋白面朝上,用ECL工作液均勻滴加至印跡膜使其覆蓋。ECL工作液使用量大約為0.125ml/cm2膜或根據(jù)個人實驗習(xí)慣使用。
4. 用平頭鑷夾住印跡膜,垂直置于吸水紙以吸去自然流下的多余工作液,注意不能讓膜干掉。
5. 快速將印跡膜置于二層保鮮膜之間,盡量趕盡氣泡。
6. 將印跡膜蛋白面朝上,放于X光膠片暗盒內(nèi)。(如果用顯像儀器直接置于儀器中拍照即可)
7. 在暗室內(nèi)放入X光片,曝光,顯影。如果在暗室中可肉眼看到比較亮的條帶,建議曝光1分鐘-3分鐘;如果肉眼看到的帶比較淡,建議曝光3-10分鐘;如果很淡或基本看不到帶,建議曝光10分鐘-30分鐘。
常見問題分析
1.為什么會發(fā)生光淬滅?
抗原濃度太高,局部過多的HRP會快速消耗底物,導(dǎo)致光信號過強,條帶呈灼燒樣。可降低抗原上樣量。
操作時間過長,膜逐漸干掉。避免膜干掉。
不良的實驗習(xí)慣導(dǎo)致設(shè)備或試劑污染。例如鐵銹和不慎沾染的顯影液、定影液,會造成光淬滅,甚至直接導(dǎo)致無熒光。
參考文獻
1.Ouyang Chen, Zhouheng Ye et al.
Methane attenuates myocardial ischemia injury in rats through anti-oxidative, anti-apoptotic and anti-inflammatory actions
Free Radical Biology and Medicine 2016 (IF=5.784)

2.Guoming Zhang, Song Gao et al.
Pharmacological Postconditioning with Lactic Acid and Hydrogen Rich Saline Alleviates Myocardial Reperfusion Injury in Rats
Scientific reports 2015 (IF=5.228)

3.Hao Liua, Anmin Chena et al.
A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 (IF=6.508)

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