五日培養法
也稱標準稀釋法或稀釋接種法。其測定原理是水樣經稀釋后，在20±1℃條件下培養5天，求出培養前后水樣中溶解氧含量，二者的差值為BOD5。較清潔的水樣（五日生化需氧量未超過7mg/L）不必進行稀釋，可直接測定。
大多數水體尤其是廢水樣品一般采用稀釋倍數法，此外對于不含或少含微生物的工業廢水，如酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水或經過氯化處理的廢水，在測定BOD5時應進行接種，以引入能降解廢水中有機物的微生物。當廢水中存在著難被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有機物或物質時，應將馴化后的微生物引入水樣中進行接種。
生物傳感器法
此法是一種將微生物技術與電化學技術相結合的分析方法，微生物傳感器是由氧電極和微 生物菌膜構成，其原理是：當將傳感電極插入溫度恒定、含飽和溶解氧的底液時，由于微生物的呼吸活性是一定的，底液中的溶解氧分子通過微生物膜并擴散進入氧 電極的速率也會保持一定，此時微生物電極輸出一穩態電流；如果底液中含有一定有機物質，有機質分子會與氧分子一起擴散進入微生物膜，由于膜中的微生物對有 機質發生同化作用而消耗一定量的氧，使擴散到氧電極表面上氧的分子減少，即擴散速率降低，使電極輸出的電流減少，并在幾分鐘內降低至新的穩態值。在一定的BOD范圍內，輸出電流降低值與BOD濃度之間線性相關。
其他測定方法
測定BOD還有庫侖法、測壓法、活性污泥曝氣降解法
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