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醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
NIBSC 06/202 人乳頭瘤病毒16 型(標準品)基于核酸的測定由冷凍干燥的制備物組成含有全長 HPV16 DNA 的重組質粒 pBR322 被克隆通過其*的 BamH1 站點 (Quint et al., 2006)。該標準已在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制,凍干在 0.5 ml 等分試樣中并儲存在 -20 °C。
世界衛(wèi)生組織國際標準
第一版 WHO 人乳頭瘤病毒 (HPV) 國際標準
16 型 DNA
NIBSC 06/202
細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。