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CD19（RM）【RM332】Biocare說明書-試驗(yàn)方法

儲(chǔ)存和穩(wěn)定性：

在2oC至8oC的溫度下儲(chǔ)存。該產(chǎn)品在打印的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的

小瓶標(biāo)簽，當(dāng)在這些條件下儲(chǔ)存時(shí)。過期后請勿使用

日期必須在定條件以外的任何條件下儲(chǔ)存

已證實(shí)的應(yīng)及時(shí)使用稀釋的試劑；存儲(chǔ)剩余的

試劑溫度為2oC至8oC。用戶稀釋試劑的穩(wěn)定性尚未

由Biocare建立。

陽性和陰性對照應(yīng)與所有患者同時(shí)進(jìn)行

標(biāo)本。如果觀察到無法解釋的意外染色

實(shí)驗(yàn)室程序的變化和抗體的問題是

如有疑問，請致電或通過

biocare上提供的技術(shù)支持信息。

試樣制備：

固定在福爾馬林中的組織適合在石蠟包埋之前使用。

骨組織應(yīng)在組織加工前脫鈣，以促進(jìn)

組織切割，防止切片機(jī)刀片損壞。1,2

正確固定和嵌入表達(dá)特定抗原靶標(biāo)的組織

應(yīng)存放在陰涼處?！杜R床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案》

CD19（RM）【RM332】

濃縮預(yù)稀釋兔單克隆抗體

901-3270-060223

TP v1（2021年10月15日）

（CLIA）在《美國聯(lián)邦法規(guī)匯編》第42卷第493.1259（b）節(jié)中要求“實(shí)驗(yàn)室必須

自檢查之日起至少保留十年的染色玻片，以及

自檢查之日起至少保留兩年的試塊。"3.

染色前的組織處理：

按照推薦方案進(jìn)行熱誘導(dǎo)表位檢索（HIER）

在下面在IHC之前，HIER的常規(guī)使用已被證明可以最大限度地減少

不一致性和標(biāo)準(zhǔn)化染色。4, 5

警告和注意事項(xiàng)：

1.該抗體含有少于0.1%的疊氮鈉。濃度較少

根據(jù)《美國聯(lián)邦法規(guī)匯編》第29卷，超過0.1%為不可報(bào)告的危險(xiǎn)品

1910.1200，OSHA危險(xiǎn)通信和EC指令91/155/EC。

用作防腐劑的疊氮鈉（NaN3）如果攝入會(huì)有毒。疊氮鈉

可能與鉛和銅管道發(fā)生反應(yīng)，形成高爆炸性金屬

疊氮化物。處理后，用大量水沖洗以防止疊氮化物

管道中的積聚。（疾病控制中心，1976年，美國國家衛(wèi)生研究所

職業(yè)安全與健康，1976）6

2.固定前后的樣本，以及暴露在其中的所有材料

應(yīng)該像能夠傳播感染一樣處理，并用

適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。切勿用嘴移取試劑，避免接觸

皮膚和粘膜與試劑和標(biāo)本。如果試劑

或標(biāo)本接觸到敏感區(qū)域，用大量清水沖洗

水量。7

3.試劑的微生物污染可能導(dǎo)致

非特異性染色。

4.規(guī)定以外的培養(yǎng)時(shí)間或溫度可能會(huì)

錯(cuò)誤的結(jié)果。用戶必須驗(yàn)證任何此類更改。

5.超過小瓶上打印的有效期后，請勿使用試劑。

6.稀釋前的抗體試劑被最佳稀釋以供使用。進(jìn)一步稀釋

可能導(dǎo)致抗原染色的損失。

7.濃縮抗體試劑的稀釋度必須在使用前進(jìn)行驗(yàn)證。

未特別推薦使用的任何稀釋劑也必須經(jīng)過驗(yàn)證

兼容性和穩(wěn)定性。

8.SDS可應(yīng)要求提供.

使用說明：

CD19（RM）的推薦染色方案[RM332]：

IntelliPATH FLX和手動(dòng)使用：

用于intelliPATH FLX和手動(dòng)使用的API3270，已被

采用MACH 4檢測系統(tǒng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。使用TBS

洗滌步驟。

過氧化物

阻斷：用過氧化1阻斷5分鐘。

預(yù)處理：

使用Diva進(jìn)行熱量回收

Declaker。參考Diva Decloker

具體說明的數(shù)據(jù)表。

蛋白質(zhì)塊

可選擇的

在RT下培養(yǎng)5-10分鐘

背景懲罰者。

主要的，重要的

抗體：RT培養(yǎng)30分鐘。

查

探頭：不適用

在RT下用

二次聚合物。

聚合物：室溫下培養(yǎng)30分鐘

具有叔聚合物。

色原：

在RT下培養(yǎng)5分鐘

Biocare的DAB–OR–在

RT搭配Warp Red。

會(huì)簽：

蘇木精沉印。用沖洗

去離子水。應(yīng)用Tacha的腮紅

溶液1分鐘。用去離子水沖洗

水

ONCORE Pro自動(dòng)幻燈片染色系統(tǒng)：

OPAI3270適用于ONCORE Pro。提到

有關(guān)具體使用說明，請參閱用戶手冊。協(xié)議

協(xié)議編輯器中的參數(shù)應(yīng)編程為

跟隨：

方案名稱：CD19 Rb

協(xié)議模板

【說明】：Rb-HRP模板1

脫蠟（DS緩沖液

選項(xiàng)）：DS2-50

抗原回收（AR

可選）：AR1，高pH；101?C

塊選項(xiàng)：緩沖區(qū)

試劑名稱、時(shí)間、，

溫度：CD19 Rb，30分鐘，25°C

Ventana BenchMark ULTRA：

AVI3270適用于BenchMark ULTRA。參考

有關(guān)具體使用說明，請參閱用戶手冊。

建議的協(xié)議參數(shù)如下：

模板/檢測：OptiView DAB IHC

預(yù)處理方案：CC1 32分鐘

過氧化物酶：初級(jí)前過氧化物酶

抑制劑

初級(jí)抗體：16分鐘，36°C

Q系列-對于徠卡BOND-III：

ALI3270適用于徠卡BOND-III。參考

有關(guān)具體使用說明，請參閱用戶手冊。

建議的協(xié)議參數(shù)如下：

染色原染色

選項(xiàng)DAB

協(xié)議名稱：IHC協(xié)議F

檢測：粘合聚合物精制

HIER:20分鐘，ER2

過氧化物塊：5分鐘

標(biāo)記（主要

抗體）：15分鐘

小學(xué)后：8分鐘

聚合物：8分鐘

混合色原

精煉：10分鐘

蘇木精：5分鐘

質(zhì)量控制

參考CLSI的設(shè)計(jì)和實(shí)施質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

免疫組織化學(xué)分析；批準(zhǔn)的指南第二版（I/LA28-

A2）CLSI Wayne，PA USA。20118

陽性組織對照：扁桃體

外部陽性對照材料應(yīng)為新鮮標(biāo)本固定，

以與相同的方式盡快處理和嵌入

患者樣本。陽性組織對照表明制備正確

組織和適當(dāng)?shù)娜旧夹g(shù)。一個(gè)陽性外部組織對照

對于每組測試條件，應(yīng)包括在每次染色運(yùn)行中。

應(yīng)選擇用于外部陽性對照材料的組織

來自具有良好特征的低水平陽性的患者樣本

產(chǎn)生弱陽性染色的靶活性。的低陽性率

外部陽性對照的設(shè)計(jì)是為了確保檢測到細(xì)微的

不穩(wěn)定或問題引起的一級(jí)抗體敏感性變化

IHC方法。市售組織對照載玻片或

與患者樣本不同處理的樣本驗(yàn)證試劑

僅性能，不驗(yàn)證組織準(zhǔn)備

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