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供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥,綜合 |
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jembio:DNA 連接酶(大腸桿菌)
DNA 連接酶(大腸桿菌) DNA 連接酶(大腸桿菌)催化雙鏈 DNA 中并置的 5' 磷酸鹽和 3' 羥基粘性末端之間磷酸二酯鍵的形成。
描述:
• 催化具有粘性末端的雙鏈DNA 片段之間磷酸二酯鍵的形成。
• 5'-磷酰基與相鄰的3'-羥基的縮合與NAD+的水解相結合。
• 適用于全長cDNA 的高效克隆(1, 2)。
單位定義:1 個單位定義為 lambda DNA 的 Hind III 片段產生 50% 連接所需的酶量。在 20 µl 檢測混合物中于 16°C 下孵育,DNA 末端濃度為 0.02 µM (50 µg/ml)。 儲存條件:儲存于-20oC。 反應緩沖液:30 mM Tris-HCl(22°C 時 pH 8.0)、1 mM 二硫蘇糖醇、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白。 最佳連接溫度為 16°C。
儲存緩沖液:10 mM Tris-HCl(22°C 時 pH 7.4)、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸銨、1 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。
質量控制:所有制劑均經過核酸內切酶和核酸外切酶污染活性測試,以及連接反應中的功能測試。 連接測定條件:30 mM Tris-HCl(22°C 時 pH 8.0)、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二硫蘇糖醇、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白和 lambda DNA 的 Hind III 片段。 16°C 孵育 30 分鐘。
jembio:DNA 連接酶(大腸桿菌)