分光光度法的基本定律是什么?
朗伯一比爾定律(Lambert-Beer law)是分光光度法的基本定律,是描述物質(zhì)對某一波長光吸收的強(qiáng)弱與吸光物質(zhì)的濃度及其液層厚度間的關(guān)系。適用于所有的電磁輻射和所有的吸光物質(zhì),包括氣體、固體、液體、分子、原子和離子。比爾-朗伯定律是吸光光度法、比色分析法和光電比色法的定量基礎(chǔ)。光被吸收的量正比于光程中產(chǎn)生光吸收的分子數(shù)目 。
物理意義是當(dāng)一束平行單色光垂直通過某一均勻非散射的吸光物質(zhì)時(shí),其吸光度A與吸光物質(zhì)的濃度c及吸收層厚度b成正比,而透光度T與c、b成反比。
范圍是:
(1) 入射光為平行單色光且垂直照射.
(2) 吸光物質(zhì)為均勻非散射體系.
(3) 吸光質(zhì)點(diǎn)之間無相互作用.
(4)輻射與物質(zhì)之間的作用于光吸收,無熒光和光化學(xué)現(xiàn)象發(fā)生.
(5)適用范圍:吸光度在0.2~0.8之間
754單光束紫外可見分光光度計(jì)采用朗伯一比爾定律,實(shí)現(xiàn)單機(jī)操作并結(jié)合聯(lián)機(jī)軟件可做光譜掃描、動(dòng)力學(xué)測量、DNA蛋白質(zhì)分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線建立等功能的儀器。