多肽在-20℃很穩定,特別是冷凍干燥并保存在干燥器中,在將它們暴露于空氣之前, 冷凍干燥多肽可以放于室溫。
這將是濕度影響減少,當無法冷凍干燥時,好的方法是以小的工作樣量存放。 對于含Cys, Met orTrP的多肽,脫氧緩沖劑對其溶解不可少,因為這種多肽可易空氣氧化, 在封瓶前,慢慢流過多肽的氮氣或氬氣也會降低氧化作用。
含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有這些肽與不含這些有問題解苷的那些肽相比,生命期有限。
多肽的保存和操做
包裝 1mg或更少的多肽按凈重包裝,聲明的小瓶重不含相關抗離子和水。 例如,氨基酸分析決定的肽含量是80%, 在1mg樣品中,那么瓶中毛重是1.25mg。大量的多肽以毛重算。標出的重量含相關抗離子和水, 例如,25mg樣品中肽百分比為90%,那么,實際肽量為25mg×90%=22.5mg,不要把肽含量和純度搞混了。肽的純度可能是100%, 而肽含量相關帶電基團(如Arg, Lys )的抗離子量和肽新水性決定。這是合成肽的本身特性。
凍干肽的保存
所有產品應存于冰箱, 最好為-20℃。多數肽以此方法可以存放幾年不變。
肽溶液的保存
溶液肽遠比凍干形式不穩定,溶液應為中性pH(pH5-7), -20℃保存的,為避免樣品的反復凍融, 最好分成小樣存放。一份樣品融凍后未用完, 應扔掉,細菌降解有時會成為溶液肽的麻煩, 因此肽應溶于無菌水, 或肽溶液用0.2μ M濾膜過濾。
多肽應用和保存
多肽具廣泛的溶解性。多肽不溶的主要問題是形成二級結構。除了最太肽外,這點都會發生, 在有多重疏水殘基的肽中更顯著。鹽會促進二級結構形成。我們建議先在無菌蒸餾水或去離子中溶解多肽。
如需要增加溶解率, 可用聲處理。溶解仍有問題, 加少量稀乙酸(10%)或氨水,會便于溶解。要長期保存多肽, 最好冷凍干燥,冷干粉可在-20℃或更低存放幾年而很少或無降解。
溶液中的多肽極不穩定。 多肽易受細菌降解,應用無菌純化水溶解。含有Met, Cgs或Try殘基的多肽溶液由于氧化,壽命有限。應溶于無氧溶劑, 為防止重復凍融的破壞, 建議溶解少量的肽以便實驗,其余多肽以固體形成保存。
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