今天為大家帶來一篇多肽生產方法之一的蛋白質水解法,還不了解的就跟著我們一起來看看吧。
利用某些水解方法將大分子的蛋白質肽鏈打斷生成具有不同活性的小分子肽的方法即為蛋白質水解法。蛋白質水解制備多肽是目前多肽最主要的生產方法,其水解易控制,可定位生產特定的肽,產品的安全性高,成本低。目前,蛋白質水解制備多肽的方法主要有兩種,即化學水解法和酶水解法。
(一)化學水解法
化學水解法是利用酸、堿水解蛋白,是傳統水解蛋白的方法,是將蛋白與一定濃度的酸或堿溶液混合,加熱至一定溫度并保持一段時間,使蛋白質的肽鏈裂解。
此方法雖然操作方便且成本低,但是由于條件劇烈,對蛋白質或多肽的破壞大,在降解時沒有規律可言,同時一些氨基酸的結構也可能發生改變,使L型氨基酸變為D型氨基酸,能形成Lys-Ala有毒物質,且難以控制水解程度,生產中基本不采用此方法。
(二)酶水解法
蛋白質可通過蛋白酶的酶切、特異性進行酶解生成有特定活性的肽類物質。酶水解法反應條件溫和,避免了化學水解法中的反應條件,具有所得酶解產物含鹽量低、無氨基酸破壞和消旋現象、無毒副產物、對環境無污染等優點,因此,無論是在實驗室中還是在工業生產中,酶水解法都是制備多肽的最常使用的方法。
酶法水解制備多肽的過程中蛋白酶的選擇是制備多肽的關鍵,其主要來源為微生物,其次為植物、動物。微生物來源的蛋白酶如堿性蛋白酶、風味蛋白酶、復合蛋白酶等,具有溶解性好、活力高、專一性不強、對蛋白質作用強烈等特點。
植物來源的蛋白酶有菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、劍麻蛋白酶等,這類蛋白酶作用位點多、專一性不強,但其來源豐富且價格相對便宜,在生產中應用廣泛。動物來源的蛋白酶如胰蛋白酶、胃蛋白酶等,專一性較強,但由于來源有限,提取技術要求高,價格一般比較昂貴。
酶法生產多肽是當前研究的熱點,也是獲取生物活性多肽常用的方法。酶水解法是選擇合適的蛋白酶水解各種蛋白質來獲得活性肽,可以在不降低食物蛋白營養價值的前提下改善蛋白質的理化性質和功能,擴展其在食品加工中的應用范圍。
酶法水解具有許多物理、化學改性無可比的優點,其反應條件溫和,反應時間短,效率高,在一定的條件下進行定位水解,其產物主要是肽而不是氨基酸,水解過程易控制,產品純度高,易分離,成本低廉等,因而能較好地滿足多肽的生產需要。
酶法水解是獲得食品級生物活性多肽的常用方法。目前已從骨蛋白、酪蛋白、乳清蛋白、大豆蛋白、玉米蛋白、水產蛋白的酶解物中制得多種功能各異的生物活性多肽。
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