在賽默飛色譜柱的使用中，我們會發現很多實驗室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。需要來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面：

　　泵頭密封圈的磨損；進樣閥轉子密封圈的磨損；析出的緩沖鹽；樣品中的復雜易吸附基質等等；其實，在工作過程中大多數的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發生作用導致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統中會有所改善，因為較低的PH系統會降低硅膠表面的硅醇基發生解離。

　　預防措施：

　　1、在液相系統中加入在線過濾器

　　在線過濾器的內部顆粒空隙一般是0.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。所以，在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過濾篩板的堵塞。注意：但是對于非常低死體積的液相系統，在線過濾器的加入可能會導致系統死體積增大峰展寬變嚴重的問題。而對于大多數的液相系統而言，色譜圖不會有太大變化。

　　2、在柱子前端使用保護柱

　　保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因為它具有和分析柱相同的內部填料，所以保護柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質組分。注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統時請取下保護柱，以防止這些強保留組分被洗脫進分析柱。保護柱如果出現吸附飽和也可能會對分離效果有影響。

　　3、對樣品進行凈化處理

　　有一些液相的分析方法沒有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進行過濾。在實際工作中，賽默飛色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：

　　4、使用時注意事項：

　　.為避免管路中的有機溶劑和氣泡進入色譜柱，先用水沖洗整個色譜系統，然后才能接入凝膠柱。

　　.不要讓有機溶劑進入柱中，否則會使填料脫水，導致柱床損壞，要小流速開啟泵，不要快速加大流速，以防止壓力迅猛升高而導致柱床損壞。15mm的柱子流速不要超過3ml/min。

　　.每次使用后務*蒸餾水沖洗干凈將含鹽的流動相置換干凈，若較長時間不用請按保存方法保存。

　　5、保存方法：

　　.將凝膠柱用蒸餾水沖凈后充上0.02%-0.05%的疊氮鈉水溶液封存，或三氯丁醇苯基汞代鹽將色譜柱封閉后低溫保存(溫度在5℃左右)在冰箱。

　　.再次使用時，用蒸餾水將保護溶液沖洗掉即可使用。

　　.如果次日還要使用也要從系統中取下，將賽默飛色譜柱封閉后存于4~8度的冰箱中冷藏。