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上海精瑞科學儀器有限公司

BIA Separations 關于蛋白純化的問題

時間:2020-3-26閱讀:871
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           三國時代,諸侯爭霸,群雄逐鹿

                               周瑜更是風度翩翩、文武雙全,

                                 全江東公瑾女孩的老公,
 


                     



                                     只可惜,到底諸葛孔明略勝*,

                                         公瑾終飲恨江東。



 

                                         pDNA的純化方案已經日漸成熟,

                                       常規方法亦可以滿足目前的需求,

                                         奈何,偏偏又沖出一匹黑馬,

                              以“省時、省力、省錢”獲得業內人士交口稱贊



 

                                              雖然常規方法還算出色,

                               但依然不禁讓人發出“既生瑜何生亮”之嘆。

 

                               話說這位洋“孔明”,生于一戶洋人家族:

                                              BIA Separations,

                                             更有一個洋氣的名字:

                                         BIA•整體柱•pDNA純化方案



                              對決:今天小編就帶大家來看一場高手之間的



 

                                                     周瑜-常規方法 

                                                   VS 

                       諸葛孔明-BIA•整體柱•pDNA純化方案
 

 

 周瑜-常規方法諸葛亮-BIA整體柱純化整體柱純化方案的優勢
純化步驟及流程對比
步驟三步法兩步法þ 步驟少
þ 裂解流程更加符合藥品的生產標準
þ 純化后的質粒純度一樣
þ 減少了分子篩的需求
þ 省時、省力、省錢
優化的前期處理必須要用中空纖維柱濃縮樣品堿裂解法,CaCl2沉淀蛋白質和RNA
 分子篩:去除RNA,同時將緩沖液置換為疏水柱緩沖液 
第二步疏水柱:分離開環DNADEAE離子柱:分離去除RNA,雜蛋白,內毒素等
第三步離子柱:分離雜蛋白,內毒素等C4柱:分離開環DNA
純化成本對比 (以200mg小規模為例)
所需耗材10L分子篩80ml套裝柱þ 總體成本可降低50%
þ 規模越大,成本降低越多
þ GMP級別的接頭,更符合GMP標準

þ 輕松放大避免了裝填驗證帶來的煩惱
100ml疏水柱 
100ml離子柱 
GMP接頭1L以下的層析沒有GMP級別的接頭,不符合GMP的標準。從8ml開配有GMP級別的接頭
純化效果 (相同的純化體積,相同的洗脫方法,相同上樣體積)
  DEAE離子柱純化的效果,質粒的純度已經達到90%以上不言而喻
疏水柱常規疏水柱回收率和純度不如BIA的C4整體疏水柱C4整體疏水柱的回收率和純度要高于常規疏水柱

 

                                            

                                      各位做過pDNA純化的老鐵們,

                                                 說句心底話,

                                              全面碾壓有木有?

                               大寫的“省時、省力、省錢有木有?

                                              話不多說,繼續上圖





                               BIA 整體柱兩步法質粒純化工藝流程總覽






 

                                      各位做過pDNA純化的老鐵們,

                                         圖看懂了嗎?


                         

 

                                        至于常規方法的效率,

                                           是不是配得上

                        它將近二倍于BIA整體柱純化方案的價格,

                                          我就說兩句話:


 

                                                      

                                             一分錢一分貨,

                                             三分錢五分貨,

                                             五分錢十分貨;

                                       

                                    BIA的純化結果已經證明了,

                                      一張整票勝過一把零錢,

                                      一個整體柱搞定一切……

                                    

 

                                                后的后,

                                              要感謝一個人,

                                    那位pNDA純化大神小哥哥,

                                       無私地貢獻出對比數據,

                                  才有了今天精彩的*打架!

                                          請收下小編的膝蓋

                                   

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