三國時代,諸侯爭霸,群雄逐鹿
周瑜更是風度翩翩、文武雙全,
全江東公瑾女孩的老公,
只可惜,到底諸葛孔明略勝*,
公瑾終飲恨江東。
pDNA的純化方案已經日漸成熟,
常規方法亦可以滿足目前的需求,
奈何,偏偏又沖出一匹黑馬,
以“省時、省力、省錢”獲得業內人士交口稱贊
雖然常規方法還算出色,
但依然不禁讓人發出“既生瑜何生亮”之嘆。
話說這位洋“孔明”,生于一戶洋人家族:
BIA Separations,
更有一個洋氣的名字:
BIA•整體柱•pDNA純化方案
對決:今天小編就帶大家來看一場高手之間的
周瑜-常規方法
VS
諸葛孔明-BIA•整體柱•pDNA純化方案
周瑜-常規方法 | 諸葛亮-BIA整體柱純化 | 整體柱純化方案的優勢 | |
純化步驟及流程對比 | |||
步驟 | 三步法 | 兩步法 | þ 步驟少 þ 裂解流程更加符合藥品的生產標準 þ 純化后的質粒純度一樣 þ 減少了分子篩的需求 þ 省時、省力、省錢 |
優化的前期處理 | 必須要用中空纖維柱濃縮樣品 | 堿裂解法,CaCl2沉淀蛋白質和RNA | |
分子篩:去除RNA,同時將緩沖液置換為疏水柱緩沖液 | |||
第二步 | 疏水柱:分離開環DNA | DEAE離子柱:分離去除RNA,雜蛋白,內毒素等 | |
第三步 | 離子柱:分離雜蛋白,內毒素等 | C4柱:分離開環DNA | |
純化成本對比 (以200mg小規模為例) | |||
所需耗材 | 10L分子篩 | 80ml套裝柱 | þ 總體成本可降低50% þ 規模越大,成本降低越多 þ GMP級別的接頭,更符合GMP標準 þ 輕松放大,避免了裝填驗證帶來的煩惱 |
100ml疏水柱 | |||
100ml離子柱 | |||
GMP接頭 | 1L以下的層析沒有GMP級別的接頭,不符合GMP的標準。 | 從8ml開配有GMP級別的接頭 | |
純化效果 (相同的純化體積,相同的洗脫方法,相同上樣體積) | |||
DEAE離子柱純化的效果,質粒的純度已經達到90%以上 | 不言而喻 | ||
疏水柱 | 常規疏水柱回收率和純度不如BIA的C4整體疏水柱 | C4整體疏水柱的回收率和純度要高于常規疏水柱 |
各位做過pDNA純化的老鐵們,
說句心底話,
全面碾壓有木有?
大寫的“省時、省力、省錢”有木有?
話不多說,繼續上圖
BIA 整體柱兩步法質粒純化工藝流程總覽
各位做過pDNA純化的老鐵們,
圖看懂了嗎?
至于常規方法的效率,
是不是配得上
它將近二倍于BIA整體柱純化方案的價格,
我就說兩句話:
一分錢一分貨,
三分錢五分貨,
五分錢十分貨;
BIA的純化結果已經證明了,
一張整票勝過一把零錢,
一個整體柱搞定一切……
后的后,
要感謝一個人,
那位pNDA純化大神小哥哥,
無私地貢獻出對比數據,
才有了今天精彩的*打架!
請收下小編的膝蓋
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