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融合mRNA 現貨

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更新時間:2020-02-13 19:45:22瀏覽次數:560

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產品簡介

應用領域 生物產業    
融合mRNA 現貨
一種用于將mRNA快速轉染到活細胞細胞質中的融合試劑
新:Fuse-It-mRNA簡便 —無需超聲處理
立即的mRNA翻譯-15–30分鐘后即可檢測到蛋白質合成
高效且具有生物相容性,尤其是在原代細胞(例如神經元或HUVEC)和干細胞中

詳細介紹

融合mRNA 現貨

融合mRNA 現貨

應用領域

  • mRNA翻譯和降解研究
  • 蛋白質生物化學研究:合成,折疊,加工,穩定性,定位,降解
  • mRNA轉移到原代細胞中而不產生轉基因生物(GMO)
  • 僅RNA的CRISPR / Cas技術進行基因組工程

技術特點

  • 不依賴脂質轉染的mRNA轉移到活細胞中
  • mRNA轉移在5-20分鐘內完成
  • 沒有內吞作用
  • 無需溶酶體降解
  • 沒有基因轉移到細胞核
  • 優化用于功能性封端和聚腺苷酸mRNA轉移的協議
  • 無需1級或2級生物安全實驗室
  • 優異的生物相容性,細胞毒性低

技術指標

形成
濃度6毫米
存儲–20°C
防爆 / EM 750/780 nm(紅外)

套件組件

融合溶液(FS)2個小瓶
中和緩沖液(NB)2個小瓶

了解更多

請在此處找到有關轉染的更多詳細信息。

在此處以PDF格式下載整個“轉染”應用指南。

選擇指南:何時使用Fuse-It-mRNA easy或Fuse-It-mRNA?

易熔mRNA融合mRNA
一次轉染的時間:20分鐘一次轉染的時間:45分鐘
特殊配方,無需超聲處理需要超聲處理
高效率*高效率*


*產品使用不同的化學配方。轉染效率取決于細胞類型和進一步優化。

與Fuse-It-mRNA的膜融合與脂質體轉染

Fuse-It-mRNA即使在原代細胞中也能高效合成蛋白質。

Fuse-It-mRNA囊泡充滿eGFP-mRNA,并與正常人表皮角質形成細胞(nHEK)融合10分鐘。eGFP-mRNA轉移后兩個半小時,50%的細胞表達eGFP,八小時后幾乎100%的細胞表達eGFP。

膜融合-蛋白表達的直接方法

立即mRNA遞送

包含mRNA的Fuse-It脂質體載體僅與細胞膜融合,然后將mRNA直接釋放到細胞質中。mRNA翻譯立即開始,而不會干擾內吞作用,溶酶體降解或有絲分裂。與傳統的基于脂質復合物的遞送方法不同,細胞不會通過胞吞作用使mRNA內在化。

融合mRNA

基于脂質復合體的DNA轉染

Fuse-It-mRNA導*其快速的mRNA表達。通過CHO-K1細胞與Fuse-It-mRNA的膜融合轉移eGFP-mRNA后六小時,近100%的細胞表達eGFP,而質粒轉染后表達eGFP的細胞數量低于10%。

高效,即使在原電池中

基于天然細胞膜的電荷,Fuse-It-mRNA脂質體能夠與大多數細胞類型有效融合。細胞系,非增殖細胞(例如神經元)和廣譜難以轉染的原代細胞可以直接翻譯細胞質中的mRNA。膜與Fuse-It-mRNA融合可實現快速高效的蛋白表達,而沒有基因組整合的風險。

易于處理

Fuse-It-mRNA方案易于使用,因為融合試劑和mRNA之間的比率在每個實驗中均保持恒定。該試劑可以不受限制地使用,因為不會產生轉基因生物。

極低的細胞毒性

與傳統的基于lipoplex的方法相比,Fuse-It-mRNA僅需要短暫的孵育時間-5至20分鐘即可獲得大的核苷酸轉移速率。此外,少量的脂質體脂質可導致大的mRNA轉移,而無需化合物釋放內體。此功能可保護敏感細胞免受載體試劑的潛在毒性影響。

融合mRNA

基于脂質復合體的mRNA轉染

與傳統的基于lipoplex的方法相比,Fuse-It-mRNA融合不會傷害細胞。在通過原代人上皮細胞(nHEK)與Fuse-It-mRNA膜融合將eGFP-mRNA轉移后的16小時,細胞的活力很高,而用基于經典lipoplex的方法處理的細胞發生了明顯的細胞死亡。

使用Fuse-It-mRNA在CHO-K1細胞中轉移eGFP-mRNA后的蛋白質合成:

在開始實驗的2小時內,細胞中已檢測到eGFP。eGFP的量增加并保持穩定超過3天(90小時)。

注意:使用功能上加帽的和聚腺苷酸化的mRNA將獲得結果。

Fuse-It-mRNA處理后各種細胞類型中mRNA表達的效率

電池類型

生物

孵化時間

mRNA表達效率*

原代細胞

骨髓來源的樹突狀細胞(BMDC)鼠類20分鐘70–80%
胚胎皮質神經元(貼壁)5–15分鐘70–90%
皮質神經元,胚胎(懸浮液)1.5–2分鐘60–70%
成纖維細胞,包皮人的10–15分鐘60–80%
肝細胞人的15–25分鐘60–80%
HUVEC人的10–20分鐘50–70%
巨噬細胞/單核細胞人的10–15分鐘30–50%
胚胎肌細胞15–25分鐘40–60%
胚胎成纖維細胞15–20分鐘30–50%
nHEK,包皮人的5–15分鐘70–80%
ZNS細胞,未純化5–15分鐘80–100%

干細胞

互聯網服務中心人的10–20分鐘70–90%
MSC人的5–15分鐘60–80%

細胞系

A549人的20–25分鐘80–100%
CHO-K1倉鼠15–20分鐘80–100%
海拉人的15–20分鐘70–90%
HL-115–20分鐘5–10%
HoxB8衍生的樹突狀細胞鼠類5分鐘90–100%
HT-1080人的15–20分鐘80–100%
HUH-7人的10–15分鐘70–90%
尤爾卡特人的1-2分鐘20–50%
L92915–20分鐘70–90%
MCF-10A人的10–15分鐘80–100%
MCF-7人的15–20分鐘70–90%
MDA-MB-231人的10–15分鐘70–90%
MDCK20–25分鐘20–40%
NIH-3T315–20分鐘70–90%
N / TERT-1(角質形成細胞,通過表達TERT永生化)人的10分鐘80–90%
大鼠15-10分鐘80–100%
RAW 264.715–20分鐘50–70%
THP-1人的1-2分鐘40–70%

mRNA的表達效率可能會有所不同,這取決于進一步的實驗因素(例如,培養基,細胞適應性,傳代數和方案優化)。

原代細胞

胚皮質神經元
生物:
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

成纖維細胞,包皮
生物:人的
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

肝細胞
生物:人的
孵化時間:25分鐘
mRNALifeAct-TagGFP2

巨噬細胞/單核細胞
生物:人的
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

HUVEC
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

HUVEC
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNALifeAct-TagGFP2

胚胎肌細胞
生物:
孵化時間:25分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

胚胎成纖維細胞
生物:
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

nHEK,包皮
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

nHEK,包皮
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNALifeAct-TagGFP2

ZNS細胞,未純化
生物:
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

干細胞

互聯網服務中心
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

MSC
生物:人的
孵化時間:5–15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

細胞系

CHO-K1
生物:倉鼠
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

CHO-K1
生物:倉鼠
孵化時間:20分鐘
mRNAmCherry

海拉
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

HL-1
生物:
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

HT-1080
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

HUH-7
生物:人的
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

尤爾卡特
生物:人的
孵化時間:1 - 2分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

L929
生物:
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

MCF-10A
生物:人的
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

MCF-7
生物:人的
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

MDA-MB-231
生物:人的
孵化時間:15分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

NIH-3T3
生物:
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

N / TERT-1
(角質形成細胞,通過表達TERT永生化)
生物:人的
孵化時間:10分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

大鼠1
生物:
孵化時間:10分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

RAW 264.7
生物:
孵化時間:20分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

THP-1
生物:人的
孵化時間:1 - 2分鐘
mRNA綠色熒光蛋白

 注:楊清辰發布

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