融合mRNA 現貨
融合mRNA 現貨
應用領域
- mRNA翻譯和降解研究
- 蛋白質生物化學研究:合成,折疊,加工,穩定性,定位,降解
- mRNA轉移到原代細胞中而不產生轉基因生物(GMO)
- 僅RNA的CRISPR / Cas技術進行基因組工程
技術特點
- 不依賴脂質轉染的mRNA轉移到活細胞中
- mRNA轉移在5-20分鐘內完成
- 沒有內吞作用
- 無需溶酶體降解
- 沒有基因轉移到細胞核
- 優化用于功能性封端和聚腺苷酸mRNA轉移的協議
- 無需1級或2級生物安全實驗室
- 優異的生物相容性,細胞毒性低
技術指標
形成 | 解 |
濃度 | 6毫米 |
存儲 | –20°C |
防爆大 / EM 大 | 750/780 nm(紅外) |
套件組件
融合溶液(FS) | 2個小瓶 |
中和緩沖液(NB) | 2個小瓶 |
了解更多
請在此處找到有關轉染的更多詳細信息。
在此處以PDF格式下載整個“轉染”應用指南。
選擇指南:何時使用Fuse-It-mRNA easy或Fuse-It-mRNA?
易熔mRNA | 融合mRNA |
一次轉染的時間:20分鐘 | 一次轉染的時間:45分鐘 |
特殊配方,無需超聲處理 | 需要超聲處理 |
高效率* | 高效率* |
*產品使用不同的化學配方。轉染效率取決于細胞類型和進一步優化。
與Fuse-It-mRNA的膜融合與脂質體轉染
Fuse-It-mRNA即使在原代細胞中也能高效合成蛋白質。
Fuse-It-mRNA囊泡充滿eGFP-mRNA,并與正常人表皮角質形成細胞(nHEK)融合10分鐘。eGFP-mRNA轉移后兩個半小時,50%的細胞表達eGFP,八小時后幾乎100%的細胞表達eGFP。
膜融合-蛋白表達的直接方法
立即mRNA遞送
包含mRNA的Fuse-It脂質體載體僅與細胞膜融合,然后將mRNA直接釋放到細胞質中。mRNA翻譯立即開始,而不會干擾內吞作用,溶酶體降解或有絲分裂。與傳統的基于脂質復合物的遞送方法不同,細胞不會通過胞吞作用使mRNA內在化。
融合mRNA
基于脂質復合體的DNA轉染
Fuse-It-mRNA導*其快速的mRNA表達。通過CHO-K1細胞與Fuse-It-mRNA的膜融合轉移eGFP-mRNA后六小時,近100%的細胞表達eGFP,而質粒轉染后表達eGFP的細胞數量低于10%。
高效,即使在原電池中
基于天然細胞膜的電荷,Fuse-It-mRNA脂質體能夠與大多數細胞類型有效融合。細胞系,非增殖細胞(例如神經元)和廣譜難以轉染的原代細胞可以直接翻譯細胞質中的mRNA。膜與Fuse-It-mRNA融合可實現快速高效的蛋白表達,而沒有基因組整合的風險。
易于處理
Fuse-It-mRNA方案易于使用,因為融合試劑和mRNA之間的比率在每個實驗中均保持恒定。該試劑可以不受限制地使用,因為不會產生轉基因生物。
極低的細胞毒性
與傳統的基于lipoplex的方法相比,Fuse-It-mRNA僅需要短暫的孵育時間-5至20分鐘即可獲得大的核苷酸轉移速率。此外,少量的脂質體脂質可導致大的mRNA轉移,而無需化合物釋放內體。此功能可保護敏感細胞免受載體試劑的潛在毒性影響。
融合mRNA
基于脂質復合體的mRNA轉染
與傳統的基于lipoplex的方法相比,Fuse-It-mRNA融合不會傷害細胞。在通過原代人上皮細胞(nHEK)與Fuse-It-mRNA膜融合將eGFP-mRNA轉移后的16小時,細胞的活力很高,而用基于經典lipoplex的方法處理的細胞發生了明顯的細胞死亡。
使用Fuse-It-mRNA在CHO-K1細胞中轉移eGFP-mRNA后的蛋白質合成:
在開始實驗的2小時內,細胞中已檢測到eGFP。eGFP的量增加并保持穩定超過3天(90小時)。
注意:使用功能上加帽的和聚腺苷酸化的mRNA將獲得結果。
Fuse-It-mRNA處理后各種細胞類型中mRNA表達的效率
電池類型 | 生物 | 孵化時間 | mRNA表達效率* |
原代細胞 |
骨髓來源的樹突狀細胞(BMDC) | 鼠類 | 20分鐘 | 70–80% |
胚胎皮質神經元(貼壁) | 鼠 | 5–15分鐘 | 70–90% |
皮質神經元,胚胎(懸浮液) | 鼠 | 1.5–2分鐘 | 60–70% |
成纖維細胞,包皮 | 人的 | 10–15分鐘 | 60–80% |
肝細胞 | 人的 | 15–25分鐘 | 60–80% |
HUVEC | 人的 | 10–20分鐘 | 50–70% |
巨噬細胞/單核細胞 | 人的 | 10–15分鐘 | 30–50% |
胚胎肌細胞 | 鼠 | 15–25分鐘 | 40–60% |
胚胎成纖維細胞 | 鼠 | 15–20分鐘 | 30–50% |
nHEK,包皮 | 人的 | 5–15分鐘 | 70–80% |
ZNS細胞,未純化 | 鼠 | 5–15分鐘 | 80–100% |
干細胞 |
互聯網服務中心 | 人的 | 10–20分鐘 | 70–90% |
MSC | 人的 | 5–15分鐘 | 60–80% |
細胞系 |
A549 | 人的 | 20–25分鐘 | 80–100% |
CHO-K1 | 倉鼠 | 15–20分鐘 | 80–100% |
海拉 | 人的 | 15–20分鐘 | 70–90% |
HL-1 | 鼠 | 15–20分鐘 | 5–10% |
HoxB8衍生的樹突狀細胞 | 鼠類 | 5分鐘 | 90–100% |
HT-1080 | 人的 | 15–20分鐘 | 80–100% |
HUH-7 | 人的 | 10–15分鐘 | 70–90% |
尤爾卡特 | 人的 | 1-2分鐘 | 20–50% |
L929 | 鼠 | 15–20分鐘 | 70–90% |
MCF-10A | 人的 | 10–15分鐘 | 80–100% |
MCF-7 | 人的 | 15–20分鐘 | 70–90% |
MDA-MB-231 | 人的 | 10–15分鐘 | 70–90% |
MDCK | 狗 | 20–25分鐘 | 20–40% |
NIH-3T3 | 鼠 | 15–20分鐘 | 70–90% |
N / TERT-1(角質形成細胞,通過表達TERT永生化) | 人的 | 10分鐘 | 80–90% |
大鼠1 | 鼠 | 5-10分鐘 | 80–100% |
RAW 264.7 | 鼠 | 15–20分鐘 | 50–70% |
THP-1 | 人的 | 1-2分鐘 | 40–70% |
* mRNA的表達效率可能會有所不同,這取決于進一步的實驗因素(例如,培養基,細胞適應性,傳代數和方案優化)。
原代細胞
胚皮質神經元 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
成纖維細胞,包皮 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
肝細胞 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 25分鐘 |
mRNA | LifeAct-TagGFP2 |
巨噬細胞/單核細胞 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
HUVEC |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
HUVEC |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | LifeAct-TagGFP2 |
胚胎肌細胞 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 25分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
胚胎成纖維細胞 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
nHEK,包皮 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
nHEK,包皮 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | LifeAct-TagGFP2 |
ZNS細胞,未純化 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
干細胞
互聯網服務中心 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
MSC |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 5–15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
細胞系
CHO-K1 |
生物: | 倉鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
CHO-K1 |
生物: | 倉鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | mCherry |
海拉 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
HL-1 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
HT-1080 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
HUH-7 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
尤爾卡特 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 1 - 2分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
L929 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
MCF-10A |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
MCF-7 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
MDA-MB-231 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 15分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
NIH-3T3 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
N / TERT-1 (角質形成細胞,通過表達TERT永生化) |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 10分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
大鼠1 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 10分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
RAW 264.7 |
生物: | 鼠 |
孵化時間: | 20分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
THP-1 |
生物: | 人的 |
孵化時間: | 1 - 2分鐘 |
mRNA | 綠色熒光蛋白 |
注:楊清辰發布