Single cardiomyocyte contractility force assay,單個(gè)心肌細(xì)胞收縮力測(cè)定系統(tǒng)
鈣瞬態(tài)采集分析系統(tǒng)
讀數(shù)
單軸收縮力,與力測(cè)量耦合的鈣瞬變分析。
標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)限制
當(dāng) hESC-心肌細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)條件下培養(yǎng)時(shí),即在 2D 單層細(xì)胞中,它們以完隨機(jī)的方式組織。因此,無(wú)法量化單個(gè)心肌細(xì)胞跳動(dòng)產(chǎn)生的單軸力。
單一心肌細(xì)胞收縮力測(cè)定的好處
在此測(cè)定中,衍生的心肌細(xì)胞附著在矩形細(xì)胞粘附區(qū)域,這會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞伸長(zhǎng)并促進(jìn)兩個(gè)相鄰微柱之間的懸浮細(xì)胞錨定。收縮力測(cè)定能夠在體外再現(xiàn)導(dǎo)致 CM 跳動(dòng)的興奮-收縮耦合效應(yīng)。
例子
hESC 心肌細(xì)胞中鈣瞬變(鈣敏感收縮蛋白的激活)的量化以及細(xì)胞收縮和力生成的同時(shí)測(cè)量(支柱偏轉(zhuǎn)分析)。
提供力量化分析設(shè)備-微柱陣列細(xì)胞力量化分析系統(tǒng)
微柱培養(yǎng)陣列及其特點(diǎn):
●每張陣列尺寸為3.2 x 3.2 mm,含10 x 18個(gè)觀測(cè)點(diǎn),每個(gè)觀測(cè)點(diǎn)有170個(gè)按六邊形排列的微柱
●微柱直徑5 μm,高15 μm,中心間距為12 μm
●微柱彈力范圍1-3 nN(有其他需求可定制)
●標(biāo)準(zhǔn)涂層是纖維連接蛋白或膠原蛋白I
●細(xì)胞外基質(zhì)(EDM)蛋白包可按找需求定制
軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖片中提取細(xì)胞力學(xué)參數(shù)(力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等)(圖3)。分析結(jié)果可保存為Excel表格,便于后續(xù)處理。
圖3
測(cè)量原理:
未變形的微柱在明場(chǎng)圖片中呈較亮的圓形,周圍是較暗的邊,通過(guò)霍夫變換可得到其形心。發(fā)生變形的微柱呈較暗的半月形,通過(guò)圖像處理可得到微柱的形變大小(圖1)。由于微柱剛度已知,所以進(jìn)而可得到每根微柱產(chǎn)生的力。
系統(tǒng)組成:
1、熒光倒置顯微鏡:
主要用于常規(guī)活細(xì)胞成像,快速高靈敏度活細(xì)胞熒光成像,主要包括顯微平臺(tái),成像系統(tǒng),工作站
2、微柱陣列培養(yǎng)設(shè)備:
將硅膠微柱陣列刻在蓋玻片上(圖1 A),并包被蛋白,然后置于培養(yǎng)皿中(圖1 B)。微柱上需要包被蛋白。標(biāo)準(zhǔn)的包被蛋白有纖連蛋白或I型膠原。若需其他包被蛋白,需提前告知。每張微柱陣列可以分析120-150個(gè)細(xì)胞,得到的數(shù)據(jù)足以進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。每種實(shí)驗(yàn)條件可進(jìn)行2-3次實(shí)驗(yàn),這樣得到的結(jié)果會(huì)更加穩(wěn)定。微柱陣列本身并未進(jìn)行包被,在使用前需要自行包被合適的蛋白(用戶自選,可購(gòu)常用的包被蛋白)。
3、光學(xué)減震臺(tái)
4、預(yù)裝MicroPost細(xì)胞牽引力、內(nèi)源力分析軟件的計(jì)算機(jī)系統(tǒng):
軟件可用于從光學(xué)顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖片中提取細(xì)胞力學(xué)參數(shù):(力/微柱、微柱坐標(biāo)、微柱形變、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布等);
做細(xì)胞如下力學(xué)特性分析,包括:
1)、微柱形變;
2)、細(xì)胞的應(yīng)變和應(yīng)力分布
3)、細(xì)胞牽引力、內(nèi)源力(cell active force)
4)、主動(dòng)收縮力
我們提供帶有微型PDMS微柱的10毫米蓋玻片,用于細(xì)胞培養(yǎng)和力評(píng)估。
不同的支柱設(shè)計(jì)和布置適合各種應(yīng)用,例如牽引力顯微鏡,收縮力和旋轉(zhuǎn)軸。
通過(guò)測(cè)量PDMS微柱響應(yīng)于細(xì)胞施加的力的撓度來(lái)進(jìn)行力評(píng)估。
>可用
直接接種細(xì)胞
>多種設(shè)計(jì)可供選擇
可用高密度和低密度微柱以及不同縱橫比的基板。
>兼容高分辨率顯微鏡。
易于觀察細(xì)胞及其對(duì)微柱變形的影響
各種微柱陣列并可以定制:
1、圓形PDMS微柱10 mm蓋玻片:
標(biāo)準(zhǔn)尺寸:24 mm圓形蓋玻片(約170μm厚度)
設(shè)計(jì):直徑為5um; 中心到中心的距離為7um
三種高度可供選擇:2um,6um和12um
2、帶狀柱子的蓋玻片:
在相同的蓋玻片上,有兩個(gè)大小不一的微柱狀帶狀分布(厚度為1毫米)
設(shè)計(jì)帶1:直徑為4um; 中心到中心的距離為8um
設(shè)計(jì)帶2:直徑為2um; 中心到中心的距離為4um
兩種高度可供選擇:2um和6um
3、方形微柱蓋玻片
設(shè)計(jì):直徑7.5um; 微柱之間的距離為20um
三種高度可供選擇:2um,6um和12um
4、可定制的直徑、高度、間距
相關(guān)產(chǎn)品:
1、 hiPSC心肌細(xì)胞肌節(jié)功能分析系統(tǒng)
2、心肌細(xì)胞高通量鈣瞬態(tài)分析
3、 高通量心肌細(xì)胞、心肌組織、肌肉收縮多功能量化跟蹤分析系統(tǒng)
4、細(xì)胞力產(chǎn)生和力傳遞綜合測(cè)量分析系統(tǒng)
5、各種生物力學(xué)設(shè)備
鈣瞬態(tài)采集分析系統(tǒng)