Single cardiomyocyte contractility force assay,單個心肌細胞收縮力測定系統(tǒng)
心肌細胞鈣濃度評估定量系統(tǒng)
讀數(shù)
單軸收縮力,與力測量耦合的鈣瞬變分析。
標準培養(yǎng)限制
當 hESC-心肌細胞在標準條件下培養(yǎng)時,即在 2D 單層細胞中,它們以完隨機的方式組織。因此,無法量化單個心肌細胞跳動產(chǎn)生的單軸力。
單一心肌細胞收縮力測定的好處
在此測定中,衍生的心肌細胞附著在矩形細胞粘附區(qū)域,這會誘導細胞伸長并促進兩個相鄰微柱之間的懸浮細胞錨定。收縮力測定能夠在體外再現(xiàn)導致 CM 跳動的興奮-收縮耦合效應。
例子
hESC 心肌細胞中鈣瞬變(鈣敏感收縮蛋白的激活)的量化以及細胞收縮和力生成的同時測量(支柱偏轉(zhuǎn)分析)。
提供力量化分析設備-微柱陣列細胞力量化分析系統(tǒng)
微柱培養(yǎng)陣列及其特點:
●每張陣列尺寸為3.2 x 3.2 mm,含10 x 18個觀測點,每個觀測點有170個按六邊形排列的微柱
●微柱直徑5 μm,高15 μm,中心間距為12 μm
●微柱彈力范圍1-3 nN(有其他需求可定制)
●標準涂層是纖維連接蛋白或膠原蛋白I
●細胞外基質(zhì)(EDM)蛋白包可按找需求定制
軟件可用于從光學顯微鏡拍攝的細胞圖片中提取細胞力學參數(shù)(力/微柱、微柱坐標、微柱形變、細胞的應變和應力分布等)(圖3)。分析結(jié)果可保存為Excel表格,便于后續(xù)處理。
圖3
測量原理:
未變形的微柱在明場圖片中呈較亮的圓形,周圍是較暗的邊,通過霍夫變換可得到其形心。發(fā)生變形的微柱呈較暗的半月形,通過圖像處理可得到微柱的形變大?。▓D1)。由于微柱剛度已知,所以進而可得到每根微柱產(chǎn)生的力。
系統(tǒng)組成:
1、熒光倒置顯微鏡:
主要用于常規(guī)活細胞成像,快速高靈敏度活細胞熒光成像,主要包括顯微平臺,成像系統(tǒng),工作站
2、微柱陣列培養(yǎng)設備:
將硅膠微柱陣列刻在蓋玻片上(圖1 A),并包被蛋白,然后置于培養(yǎng)皿中(圖1 B)。微柱上需要包被蛋白。標準的包被蛋白有纖連蛋白或I型膠原。若需其他包被蛋白,需提前告知。每張微柱陣列可以分析120-150個細胞,得到的數(shù)據(jù)足以進行統(tǒng)計學分析。每種實驗條件可進行2-3次實驗,這樣得到的結(jié)果會更加穩(wěn)定。微柱陣列本身并未進行包被,在使用前需要自行包被合適的蛋白(用戶自選,可購常用的包被蛋白)。
3、光學減震臺
4、預裝MicroPost細胞牽引力、內(nèi)源力分析軟件的計算機系統(tǒng):
軟件可用于從光學顯微鏡拍攝的細胞圖片中提取細胞力學參數(shù):(力/微柱、微柱坐標、微柱形變、細胞的應變和應力分布等);
做細胞如下力學特性分析,包括:
1)、微柱形變;
2)、細胞的應變和應力分布
3)、細胞牽引力、內(nèi)源力(cell active force)
4)、主動收縮力
我們提供帶有微型PDMS微柱的10毫米蓋玻片,用于細胞培養(yǎng)和力評估。
不同的支柱設計和布置適合各種應用,例如牽引力顯微鏡,收縮力和旋轉(zhuǎn)軸。
通過測量PDMS微柱響應于細胞施加的力的撓度來進行力評估。
>可用
直接接種細胞
>多種設計可供選擇
可用高密度和低密度微柱以及不同縱橫比的基板。
>兼容高分辨率顯微鏡。
易于觀察細胞及其對微柱變形的影響
各種微柱陣列并可以定制:
1、圓形PDMS微柱10 mm蓋玻片:
標準尺寸:24 mm圓形蓋玻片(約170μm厚度)
設計:直徑為5um; 中心到中心的距離為7um
三種高度可供選擇:2um,6um和12um
2、帶狀柱子的蓋玻片:
在相同的蓋玻片上,有兩個大小不一的微柱狀帶狀分布(厚度為1毫米)
設計帶1:直徑為4um; 中心到中心的距離為8um
設計帶2:直徑為2um; 中心到中心的距離為4um
兩種高度可供選擇:2um和6um
3、方形微柱蓋玻片
設計:直徑7.5um; 微柱之間的距離為20um
三種高度可供選擇:2um,6um和12um
4、可定制的直徑、高度、間距
相關產(chǎn)品:
1、 hiPSC心肌細胞肌節(jié)功能分析系統(tǒng)
2、心肌細胞高通量鈣瞬態(tài)分析
3、 高通量心肌細胞、心肌組織、肌肉收縮多功能量化跟蹤分析系統(tǒng)
4、細胞力產(chǎn)生和力傳遞綜合測量分析系統(tǒng)
5、各種生物力學設備
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