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PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃如何設(shè)計(jì)

閱讀:689        發(fā)布時(shí)間:2021-7-21

PCR實(shí)驗(yàn)室布局

試劑準(zhǔn)備區(qū):擴(kuò)增試劑的制備、包裝和貯存

樣品處理區(qū):樣品注冊(cè)、子包;核酸提取、保存和加載

擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、注冊(cè)和報(bào)告

預(yù)擴(kuò)增區(qū)和后擴(kuò)增區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi),并且必須使用不同的房間,最好在兩個(gè)區(qū)域之間有一定的間隔。

使用商業(yè)試劑盒在樣品處理區(qū)域中制備小試劑

樣品處理區(qū)域和試劑制備區(qū)域可以位于同一房間,只要滿足以下操作和清潔要求:

在生物安全柜中操作;

每個(gè)實(shí)驗(yàn)者、實(shí)驗(yàn)組使用各自的試劑和消耗品;

將含有污染物的容器密封并使用一次;

實(shí)驗(yàn)前后對(duì)操作區(qū)域和共用設(shè)備進(jìn)行有效清潔和消毒。

PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)劃要點(diǎn)

1、主要結(jié)構(gòu):

主體是彩鋼板、鋁合金型材。房間的所有內(nèi)角、正角均由鋁合金50圓形鋁制成,這解決了容易污染的問(wèn)題、灰塵、難以清潔等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固,線條簡(jiǎn)潔,外形美觀,密封性好。

2、標(biāo)準(zhǔn)三區(qū)分離和氣壓調(diào)節(jié):

PCR過(guò)程分為試劑制劑。在三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)中進(jìn)行、樣品制備和PCR擴(kuò)增測(cè)定。整個(gè)地區(qū)都有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)都設(shè)有一個(gè)緩沖區(qū),每個(gè)區(qū)域都受氣壓調(diào)節(jié),從而在整個(gè)PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保護(hù)試劑和標(biāo)本免受氣溶膠污染,減少了對(duì)人和環(huán)境的擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。

緩沖器I可以打開(kāi),緩沖器II的排氣扇和PCR放大區(qū)域在外面排出,可調(diào)節(jié)風(fēng)量的出風(fēng)口安裝在實(shí)驗(yàn)區(qū)和每扇門的外壁上,空氣通風(fēng)在室內(nèi)通過(guò)回風(fēng)口。

3、消毒:

紫外燈安裝在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域和三個(gè)緩沖區(qū)的頂部,并在傳輸窗口內(nèi)進(jìn)行消毒。

在試劑制備區(qū)域和樣品制備區(qū)域中還提供移動(dòng)的紫外燈,以對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)進(jìn)行部分消毒。

4、機(jī)械鏈不銹鋼傳遞窗:

試劑和樣品通過(guò)機(jī)械互鎖不銹鋼(不建議用于電子聯(lián)鎖)進(jìn)行交付,以確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過(guò)程中不被污染(個(gè)人分流)

5、地

建議使用PVC盤繞地板或自流動(dòng)地板以獲得良好的地面。易于清潔和耐腐蝕。水磨石地板也可以無(wú)條件地使用,或者大塊瓷磚(至少800 mm x 800 mm)接縫需要小于2 mm

6、照明

燈具應(yīng)清潔光滑,可達(dá)到易于清潔的特點(diǎn)、無(wú)塵。

注意施工過(guò)程

●標(biāo)準(zhǔn)化的安裝流程和全面的服務(wù)流程

●嚴(yán)格遵循科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。

●安裝前,需要確定以下安裝條件,如:電源電壓,電源線位置,電話網(wǎng)線入口位置,進(jìn)水壓力,最小安裝空間,地面,通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管位置等。理想的空間大小和通風(fēng)口的大小。

>>>設(shè)計(jì)要點(diǎn)<<<

PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式或組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn),通常通過(guò)試劑制備、樣品處理、核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟,如果實(shí)驗(yàn)過(guò)程需要,還應(yīng)增加樣品破碎過(guò)程。

一個(gè)、分散形成PCR實(shí)驗(yàn)室

所謂的分布式PCR實(shí)驗(yàn)室是指完成上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)室彼此相距很遠(yuǎn)并且處于分布式排列。對(duì)于這種類型的PCR實(shí)驗(yàn)室,不需要特殊條件,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)不容易相互干擾。

兩個(gè)、組合形成PCR實(shí)驗(yàn)室

所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室是指完成PCR的四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)室彼此相鄰排列以形成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合式PCR實(shí)驗(yàn)室,由于每個(gè)實(shí)驗(yàn)的集中安排,容易引起相互干擾,因此對(duì)整體布局和屏障系統(tǒng)有一定的要求。每個(gè)艙室在入口處設(shè)有緩沖室,以減少室內(nèi)和室外空氣交換。

PCR實(shí)驗(yàn)室不可忽視的幾點(diǎn)設(shè)計(jì)

1.實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)和壓力控制

PCR實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有嚴(yán)格的純化要求,但為了避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域之間存在交叉污染的可能性,建議使用全流量全流量氣流組織。同時(shí),要嚴(yán)格控制排氣的比例為、,以保證每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

2.預(yù)防和控制污染

PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。在實(shí)踐中,以下類型的污染是常見(jiàn)的:擴(kuò)增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑污染和試樣之間的污染。由于污染發(fā)生,必須停止實(shí)驗(yàn)直到找到污染源,并且必須丟棄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并且需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)。因此,在污染發(fā)生后,在實(shí)驗(yàn)室周圍浪費(fèi)尋找污染源不僅浪費(fèi)時(shí)間和麻煩,而且浪費(fèi)人力和資源。因此,為避免污染,應(yīng)首*行預(yù)防,而不是排除。

PCR實(shí)驗(yàn)室不可少的嚴(yán)格管理

1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)入或離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室,必要時(shí)設(shè)置進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的獨(dú)立通道和門;

2)盡量減少實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)不必要的移動(dòng),以減少交叉污染的可能性

3)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是擴(kuò)增產(chǎn)物污染的最重要來(lái)源。廢液不能傾倒在實(shí)驗(yàn)室中。必須將其浸入消毒劑溶液中并丟棄在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方。使用過(guò)的堅(jiān)端是一次性的。材料也應(yīng)在消毒液中浸泡和消毒處理,如焚燒;

4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能存在一些基因突變和有毒物質(zhì),應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。

3.完整的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施

完整的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是確保實(shí)驗(yàn)工作的必要條件。設(shè)備和儀器應(yīng)根據(jù)每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容配備,如超潔凈工作臺(tái)、離心機(jī)、取樣器等。


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