2019 年底,一項全新的 Western blot 成像技術—eBlot 接觸式成像,在中國的上海醫谷創新面世。這項技術完美解決了傳統 Western blot 成像儀器的靈敏度不夠、定量范圍窄、成像時間太長以及占地面積太大的問題;相對于冷 CCD 成像技術,eBlot 接觸式成像將成像靈敏度提升了 2-3 個數量級, 定量范圍提升 2 個數量級, >95% 的樣品成像時間縮短到 1 秒以內,且儀器的體積縮小到傳統儀器的 1/10 不到。該技術一面世就受到科研人員的認可,已幫助北京大學、上海交通大學、中科院、中國CDC等眾多國家學術研究單位解決了他們研究中遇到的 Western blot 成像難題。
欲了解此技術的詳情,我們還需要從 Western blot 的歷史和 Western blot 成像方法的歷史講起。
1981 年美國斯坦福大學的喬治·斯塔克(George Stark)發明了蛋白質印跡(Western blot),至今已有 40 年的時間。Western blot 作為一個經典的蛋白定量技術,被越來越多的人所使用,已成為每個分子生物學實驗室所必須要做的一個實驗。但是 Western blot 技術本身的發展卻非常緩慢,尤其在成像檢測技術方面已有 20 多年的時間沒有新的突破。
Western blot 常用的幾種成像方法及優劣勢如下:
成像方法 | 優勢 | 劣勢 | |
直接顯色法 | DAB顯色 | 1,操作簡單 2,無需暗房 3,無需成像設備 4,成本低 | 1,靈敏度低,低豐度蛋白無法檢測 2,定量范圍窄,只有 1.5OD,表達差異大的蛋白無法準確定量 |
化學發光法 | 暗房壓片 | 1,壓片過程沒有光損失,靈敏度高,可以實現極微弱信號的成像 2,無需購置設備 | 1,需要一個獨立的暗房 2,定量范圍窄,只有 1.8OD,表達差異大的蛋白無法準確定量 3,需要膠片、顯影液定影液等耗材 |
冷 CCD 成像 | 1,定量范圍高,高達 4.8OD,表達量差異大的蛋白可以準確定量 2,檢測靈敏度高 | 1,成像過程有大量的光損失,達不到壓片的靈敏度,非常低豐度的蛋白檢測不到 2,需要購置冷 CCD 成像設備、維護成本* | |
熒光法 | RGB 可見熒光 | 1,可以實現多重檢測 | 1,Western 膜本身的熒光背景非常高,導致成像靈敏度非常低,低豐度蛋白檢測不到 2,操作過程需要在避光的環境下進行 3,熒光抗體種類不夠多且成本高 4,多重檢測需要做大量的實驗條件優化 5,需要特殊的試劑 6,熒光成像設備成本高 |
近紅外熒光 | 1,可以實現多重檢測 2,相對于可見熒光背景低 | 1,Western 膜本身的熒光背景導致成像靈敏度不夠,低豐度蛋白檢測不到 2,操作過程需要在避光的環境下進行 3,熒光抗體種類不夠多且成本高 4,多重檢測需要做大量的實驗條件優化 5,需要特殊的試劑 6,近紅外熒光成像設備成本非常高 |
在各種成像方法中,冷 CCD 化學發光成像由于具有操作簡單、靈敏度高、定量范圍寬等優勢,成為了受歡迎的成像方法,被超過 99% 的科研人員所使用。
但是,隨著科研的不斷深入,科研人員反應 Western blot 也越來越難做,科學家在 Western bot 方面面臨的難題具體表現在:
雖然冷 CCD 化學發光成像方法有多種優勢,被絕大多數人使用,但是由于其本身的技術限制,在面臨超低豐度蛋白、稀有樣品和表達差異巨大的樣品時就顯得無能為力了,這些隨著科研逐步深入所帶來的難題急需新的技術出現來解決。
這些技術限制包括:
技術的瓶頸限制了冷 CCD 成像技術的發展,也間接影響科研的發展。工欲善其事必先利其器,必須要有更先進的技術才能突破現有方法的瓶頸,進而更好的為科研服務。
科學進步的歷史進程中,儀器公司扮演了極其重要的角色,科學家開發出新的技術,儀器公司利用這些技術開發出新的工具來服務更多的科學家,循環往復,持續進步。
Western 成像領域同樣是這樣,eBlot擁有科學家團隊和創新經驗豐富的儀器團隊,技術和創新的思想碰撞出了一個 Western 成像領域的革命性突破—eBlot 接觸式成像技術。這項革命性創新的技術克服了現有技術在成像靈敏度、定量范圍、成像速度和儀器體積大等諸多瓶頸,實現了 Western 成像技術新的飛躍,幫助科學家在新的科形勢下的研競爭中取得先機。
eBlot 接觸式成像技術主要突破點如下:
1,Western 膜直接貼在感光芯片上進行成像,所有信號均被采集,沒有任何光損失,飛躍的提高了成像的靈敏度。
2,成像芯片的面積是現有成像技術芯片面積的 137 倍,超大的感光芯片具有超高的信號采集能力,讓極其微弱的信號都無處可藏。
3,單個像素尺寸是現有成像技術單個像素尺寸面積的 493 倍,巨大的像素可以將定量范圍提升兩個數量級,實現對樣品的定量。
4,新的成像技術不再依賴于鏡頭進行成像,消除了鏡頭透鏡組造成的光信號損失。
5,新的成像技術可以將儀器體積壓縮到小于現有成像儀器體積的 1/10,大大節省實驗室空間。
生命科學領域發展越來越快,科研也進入到范圍的高度競爭狀態,科研人員要跟*的科學家競爭,這種新形勢下的競爭對于先進工具的依賴越來越高。eBlot化學發光成像儀,幫助中國的科學家在新形勢下的激烈競爭中*。
eBlot 在北京大學等各個實驗室
代理商:靶點科技(北京)有限公司
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