PBS LiposomesPBS對照脂質體

產品簡介：

清除巨噬細胞(depletion of macrophages)是研究巨噬細胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹Vrije University 的Nico van Rooijen教授開發的一款Clodronate Liposomes，可以利用巨噬細胞的內吞機制，將脂質體包裹的膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細胞內，利用“特洛伊木馬機制”從而達到去除巨噬細胞的目的。

作用原理:

兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體，磷脂雙分子層中間通過水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質體的過程中被包裹進磷脂雙分子層之間的水相中(如圖1)。游離的氯磷酸鹽不能自由的通過脂質體的磷脂雙分子層。隨著脂質體被巨噬細胞吞噬，在巨噬細胞溶酶體磷酸酶的作用下，溶解在脂質體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來，并累積在細胞內，當其達到一定濃度時，巨噬細胞將會受到不可逆轉的損傷，從而進入凋亡過程。從死亡的巨噬細胞中釋放出來的氯磷酸鹽在細胞外的半衰期極短(大約15min)，可以通過泌尿系統排除體外。

CONTROL LIPOSOMES (PBS)

對照脂質體（PBS）

SKU: P-005

Category: Liposomal formulations

clodronateliposomes脂質體P-005構成：

氯膦酸鹽脂質體：

由同心磷脂雙層構成的人造球，該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS（磷酸鹽緩沖液）水溶液。脂質體是顆粒，大小大。3微米。它們在PBS中形成懸浮液，在儲存時會沉淀，在試管或燒瓶的底部形成沉淀。在對實驗動物給藥之前，應先搖晃懸浮液，以回收均勻的懸浮液。

對照脂質體（PBS）：

對照脂質體不含氯膦酸鹽。它們僅含有PBS，可用于對照實驗，以查明注射氯膦酸鹽脂質體后觀察到的效果是否僅是由于巨噬細胞耗竭所致。

clodronateliposomes脂質體CP-005-005產品描述

磷脂雙層由磷脂酰膽堿和膽固醇組成。將所有脂質體制劑懸浮在無菌磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中：

– 10 mM的Na2HPO4；
– 10毫米NaH2PO4；
– 140毫米氯化鈉。

我們所有的脂質體均帶負電荷，因此不會一起阻塞。懸浮液中的脂質體沒有大小，這意味著它也包含越來越大的脂質體（大3微米）。平均而言，脂質體的大小為1.7微米。

氯膦酸鹽脂質體：人工制備的脂質囊泡的懸浮液，包裹了氯膦酸鹽。懸浮液中氯膦酸鹽的濃度約為。5毫克/毫升 氯膦酸鹽以CH2Na2Cl2O6P2·5 H2O的形式封裝在脂質體囊泡中。

PBS脂質體：人工制備的脂質囊泡的懸浮液，其中包裹了PBS水溶液。這些不含氯膦酸鹽，可用于對照實驗。

熒光DiI脂質體：人工制備的脂質囊泡的懸浮液，其中包封了PBS水溶液，并用熒光染料DiI標記。它們不含氯膦酸鹽，可用于研究通過特定給藥途徑注射的脂質體是否能夠到達要研究的巨噬細胞。

儲存和使用說明

到達脂質體后，應將其儲存在4 – 8ºC（或39 – 47ºF）之間。脂質體懸浮液不得冷凍，也不要暴露于高溫下。這可能會對磷脂雙層造成干擾，可能導致氯膦酸鹽從脂質體中泄漏出來。

給藥前，首先使脂質體達到室溫，然后輕輕搖動或攪拌懸浮液。一段時間后，脂質體易于沉淀，導致小瓶中的分布不均勻。當注射花費太多時間時，脂質體甚至可能在注射器中沉淀。如果使用同一注射器注射多只動物，可能會導致劑量不同。

不建議稀釋懸浮液，但如有必要，請使用PBS或鹽水。

我們建議客戶在發貨后16周內使用脂質體制劑。強烈建議不要在到期日期之后使用。在此期間之后，污染的風險會增加，并且可能會發生輕微的功能喪失。

作用機理

巨噬細胞在免疫和非免疫防御機制中起重要作用。它們是抵御滲透到脊椎動物體內的細菌，病毒和其他形式的微生物污染的首道防線。巨噬細胞是大型細胞，幾乎存在于所有身體組織中，它們可以具有不同的形式和名稱（例如庫普弗細胞，肺泡巨噬細胞，小膠質細胞，破骨細胞，紅髓巨噬細胞）。巨噬細胞“清除”，它們攝入并消化可能是潛在病原體的所有異物，微生物，癌細胞和細胞碎片。該過程稱為吞噬作用。巨噬細胞主要通過可溶性分子如細胞因子和趨化因子的介導來進一步調節許多非吞噬細胞的功能。他們參與先天免疫，

脂質體是人工制備的球體，由同心磷脂雙層組成。當磷脂分散在水中時，親水性頭部將構成脂質體的兩個外部部分，而疏水性脂肪酸基團將構成內部部分（見圖1）。水室分隔雙層，親水分子可以溶解在其中，形成脂質體包封的分子。氯膦酸鹽（二氯亞甲基雙膦酸酯或Cl2MBP）是一種親水性分子，可以封裝在磷脂雙層中。游離氯膦酸鹽不易穿過細胞膜，并通過腎臟系統從循環中迅速清除（即數分鐘內）。但是，氯膦酸鹽脂質體包埋在脂質體中時，會被巨噬細胞吞噬，無法逃脫（見圖2）。磷脂雙層被溶酶體磷脂酶消化，而氯膦酸鹽未被消化并且保留在巨噬細胞中。巨噬細胞攝入的磷脂雙層和脂質體越多，在巨噬細胞內積累的氯膦酸鹽越多。超過一定的細胞內濃度，氯膦酸鹽將通過啟動程序性細胞死亡（即凋亡）來消除巨噬細胞。

圖1.氯膦酸鹽脂質體的示意圖。囊泡由同心的磷脂雙層構成，被水性隔室隔開。雙層由親水和疏水基團組成。將氯膦酸鹽（在此以黑色方塊表示）溶解在水溶液中并封裝在脂質體內。

圖2.巨噬細胞對氯膦酸鹽脂質體的攝取和消化示意圖。巨噬細胞通過胞吞作用攝入氯膦酸鹽脂質體，然后與含有磷脂酶的溶酶體（L）融合（箭頭）。磷脂酶破壞的磷脂雙層越多，在巨噬細胞內釋放的氯膦酸鹽（黑色方塊）越多。巨噬細胞終通過凋亡被殺死。（N =巨噬細胞核）。

 
因此，氯膦酸鹽脂質體可用于通過消耗巨噬細胞來研究巨噬細胞功能。例如，它們可以應用于各種自身免疫性疾病，移植，神經系統疾病和基因治療的模型。氯膦酸鹽脂質體只有在可以達到的情況下才能耗盡巨噬細胞。一些組織可以形成脂質體的屏障。通過選擇氯膦酸鹽脂質體的正確給藥途徑，可以耗盡特定的器官或組織的巨噬細胞。有關管理協議的更多信息，請單擊此處。

PBS脂質體主要用于對照實驗。但是，這些也可以在某些時間段內通過飽和來阻止吞噬作用。因此，PBS脂質體不能代表正常健康的，未阻斷的，未抑制的和未活化的巨噬細胞的對照實驗。當比較氯膦酸鹽脂質體和PBS脂質體的作用時，其作用因此可能小于預期。

有關更多信息，請參見：

– Van Rooijen，N.和Sanders，A.（1994）。脂質體介導的巨噬細胞耗竭：作用機理，脂質體制備和應用。免疫學雜志，174（1-2），83-93。
– Van Rooijen，N.，Sanders，A.和van den Berg，TK（1996）。脂質體介導的氯膦酸鹽和丙am的細胞內遞送誘導的巨噬細胞凋亡。免疫學雜志，193（1），93-99。

ClodronateLiposomes巨噬細胞清除套裝