細胞胞質疏松,狀態不好,養不起來,怎么辦?
策略 1:一般情況下,從血清下手就行,要么換好血清,要么提高血清濃度,血清濃度提高到 15%~20% 培養 48 h,換成正常 10% 的濃度,用高濃度的血清培養時間過長對細胞有毒性。
策略 2:血清下手之后可以同時采取提高細胞密度的方法,從培養瓶換到六孔板,12 孔板等,細胞密度大,細胞分泌的細胞因子多,腫瘤細胞通過旁分泌途徑促進細胞生長。
預防策略:細胞胞質疏松,老化的原因在于細胞傳代次數比較多,胰酶消化時間太長,這時候,一定要控制細胞傳代次數,注意胰酶消化時間,胰酶消化時間過長,容易導致細胞狀態不佳以及胞質疏松。有一招,元元沒試過,可以嘗試,將細胞凍起來,過段時間復蘇,細胞會長得比較好。
長途運輸過來裝滿培養液的細胞如何處理?
很多人都會遇到從其他地方買來細胞或者快遞運來細胞,裝滿培養基的培養瓶的細胞怎么處理的問題。
第 1 步:先放 37℃ 培養箱放置 4 小時,這樣細胞在通過長途跋涉以后得以穩定,觀察細胞狀態。
第 2 步:將新鮮培養基和舊的培養基 1:1 稀釋,如果細胞狀態不好,可以將血清濃度提到 15%,否則正常培養,這樣有一個過渡期,不至于細胞換血清之后狀態不佳,15% 的血清培養 48 h 之后換成正常濃度培養。
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一、血清類: 涉及到的血清品牌:SERANA、GIBCO、Hyclone、BI、Bovogen、Gemini、美國NTC、biowest、PAN、SIGMA、康寧、PAA……涉及到血清分類:南美源、北美源、澳洲源、超低Igg、透析型、活性炭處理、高脂、低脂型等,另外還有無外泌體血清、科研用人混合血清、AB血清、馬血清、小牛血清、驢血清、雞血清、兔血清、大鼠血清等
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