告客戶書:買來的WinSera血清需要過濾嗎?
WinSera血清使用前是否需要過濾?
本公司血清在ISO 13485認證的廠房中生產,經過3次0.1 μm過濾,出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養測試及無菌檢測,污染幾率非常非常非常低(重要的事情說三遍)。通常細胞污染有非常多的可能性,根據協助使用者進行分析檢測,結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。
因此買來的血清不需要再次進行過濾。
幾種血清的比較:
項目 | 等級 |
提取血清體積/只牛 | 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L) |
培養細胞的效果 | 胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
價格 | 胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規來說,年齡越小的牛血清,細胞培養效果越好。胎牛血清培養效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養。
胎牛血清成分已知的已有上千多種,以下為主要成分表:
成分 | 濃度 | 成分 | 濃度 |
蛋白和多肽 | - | 磷脂 | 0.7-3.0 mg/ml |
白蛋白 | 20-50mg/ml | 丙酮酸 | 2-10 ug/ml |
胎球蛋白 | 10-20mg/ml | 碳水化合物 | - |
纖連蛋白 | 1-10 ug/ml | 葡萄糖 | 0.6-1.2 mg/ml |
球蛋白 | 1-15 mg/ml | 乳酸 | 0.5-2.0 mg/ml |
α-抗胰蛋白酶 | 0.5-2.5 mg/ml | 多胺 | - |
轉鐵蛋白 | 2-4 mg/ml | 丁二胺,亞精胺 | 0.1-1.0 uM |
生長因子 | - | 尿素 | 170-300 ug/ml |
EGF, PDGF, IGF-I, IL-1 | 1-100 ng/ml | 無機物 | - |
氨基酸 | 0.01-1.0 uM | 鈣,氯化物,鉀,磷 | - |
脂質 | - | 激素 | - |
膽固醇 | 10 uM | 胰島素 | 1-100 ng/ml |
脂肪酸 | 0.1-1.0 uM | 皮質醇 | 10-200 nM |
亞油酸 | 0.01-0.1 uM | 維生素 | 10 ng-10 ug/ml |
導致細胞污染的原因主要有以下幾方面:
環境:水浴鍋、培養箱水盤、細胞培養箱內壁、超凈臺、桌面及試劑瓶身、細胞房空氣消毒。
操作:細胞復蘇、傳代、凍存等過程中也可帶入污染。
試劑:血清、基礎培養基、胰酶、輔助試劑、營養添加物等。
耗材:培養皿或培養瓶、槍頭。
細胞本身:本身攜帶污染、細胞老化、分化等。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規格 | 庫存狀態 |
優級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現貨 |
如何進行污染源排查?
血清:其他試劑保持不變,僅更換血清。
基礎培養基:其他試劑保持不變,僅更換基礎培養基。
PBS:其他試劑保持不變,僅更換PBS。
胰酶:若細胞復蘇的很好,一傳代就污染,可以嘗試其他試劑保持不變,更換消化用胰酶,看細胞狀態。
細胞反復復蘇都會出現污染,那可保持培養體系不變,培養其他類型且適用于此培養體系的細胞,觀察是否有污染出現。整個營養體系:基礎培養基、血清、營養添加物都可使用控制變量法進行排查。
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