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細胞名稱:人卵巢癌細胞(CAOV-3)
細胞介紹:細胞1976年建系,來源于一位54歲白人女性的卵巢癌組織。
細胞特性:
1)來源:人,卵巢癌組織
2)形態(tài):貼壁,上皮樣細胞
3)含量:>1x106
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用。細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;P/S雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 凍存細胞的復(fù)蘇::
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,*培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例;
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項:
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。
卵巢癌是哪些因素引起的呢?
1、家族遺傳
卵巢癌是具有遺傳性的,尤其是染色體顯性遺傳,是會大大增加女性卵巢癌風險的。家里有母親患卵巢癌的情況,女兒患卵巢癌的可能性就會變大。
2、激素影響
激素對卵巢上皮細胞有一定的刺激作用,比如雌性激素和雄性激素,如果過多地使用含有雌性激素的藥物,比如避孕藥,是可能增加患卵巢癌的風險的。
3、患有不孕癥
存在不孕癥的女性患者卵巢癌的風險是比較大的,因為不孕癥說明女性可能存在一定的婦科疾病,未及時得到治療就會誘發(fā)卵巢癌。
4、子宮內(nèi)膜異位癥
患有子宮內(nèi)膜異位癥的患者,卵巢癌發(fā)生的風險會增加,尤其是在月經(jīng)期間,沒有簡單的方法來將血液排出體外,就可能出現(xiàn)疼痛癥狀,患卵巢癌的可能性也就越大。
5、年齡因素
人在年齡逐漸增大的同時,身體細胞和器官開始老化,在飲食不健康和生活不衛(wèi)生情況的影響下,就可能導(dǎo)致卵巢癌的發(fā)生。
卵巢癌患者會有哪些癥狀表現(xiàn)呢?
1、月經(jīng)紊亂
部分的卵巢癌患者會出現(xiàn)月經(jīng)不正常的情況,當卵巢癌細胞逐漸增多的時候,就會大大的影響女性的卵巢功能,使患者出現(xiàn)月經(jīng)量減少或者是不來月經(jīng)的癥狀表現(xiàn)。
2、腹脹
卵巢癌患者會有腹脹等腸胃不適的表現(xiàn),因為腫瘤在增長的同時,會擠壓到周圍的組織,導(dǎo)致腹腔和胸腔受到一定的壓迫,從而表現(xiàn)出腹脹的癥狀。
3、劇烈腹痛
當腫瘤細胞在增長的過程中出現(xiàn)破裂、扭轉(zhuǎn)等情況時,是可能產(chǎn)生劇烈的腹部疼痛感覺的,在出現(xiàn)這個癥狀時,要及時的去醫(yī)院治療,以免造成不必要的影響。
4、下肢水腫
卵巢腫瘤隨著體積增大到一定程度的時候,是會壓迫到盆腔靜脈的,從而導(dǎo)致血液流通不暢、下肢水腫等情況的出現(xiàn)。
以上這些就是常見的卵巢癌病因和癥狀表現(xiàn),女性應(yīng)該做好預(yù)防措施,尤其是在患婦科疾病時,要及時的采取措施來治療,以免誘發(fā)卵巢癌。患卵巢的女性還要注意飲食和生活習慣上的調(diào)整,幫助疾病更快地恢復(fù)。
人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系 5-8F 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長
人鼻咽癌細胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長
人鼻咽癌細胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長
豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長
人卵巢癌細胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S
人卵巢癌細胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S
人卵巢腺癌細胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S
人卵巢癌細胞 CoC1 1640+10%FBS+1%P/S
人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S
人卵巢癌細胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S
人卵巢癌細胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S
人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S
人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN) 1640+10%FBS+1%P/S
人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S
人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰島素
人卵巢癌細胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S
人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S
小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S
倉鼠卵巢細胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S
倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。
中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S
中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1(懸浮) CHO GROW CD2培養(yǎng)基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S
中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S
倉鼠卵巢細胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S
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