無外泌體血清不包含各種由蛋白質編碼和調節的RNA,包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA。它們中的大部分(>70%)仍然存在于通過長時間超速離心獲得的無囊泡FBS中,這些FBS常用于研究細胞外囊泡(EV)和細胞間通訊。FBS相關的RNA將與細胞外囊泡RNA(exrna)一起被分離,這將干擾下游的RNA分析。因此,在實驗設計過程中,有必要采取預防措施,減少FBS源RNA的干擾。
1、內毒素含量低,經過三次納米過濾。
2、嚴格控制批次差異。
3、可靠和可追溯的來源。
4、每個批次都應提供相應的檢驗檢疫報告。
5、適用于各種特殊的細胞培養。
6、對于干冰運輸,建議儲存溫度為-20℃至-10℃。
無外泌體血清是指直徑為30-100納米的盤狀囊泡,其中含有多種蛋白質、mRNA、非編碼RNA和其他分子。外泌體主要來自細胞內的多囊體,多囊體的外膜與細胞膜融合后釋放到細胞外基質中。目前,大量文獻報道,幾乎所有類型的細胞都能產生和釋放外泌體。在不同的生物液體(血液、尿液、腦脊液、唾液、牛奶、腹水)中發現大量的外泌體。不含外泌體的血清被細胞分泌和釋放后,通過個別體液在體內擴散。被靶細胞攝取后,釋放內部生物分子,參與細胞間交流,調節細胞功能。血清的滅活處理步驟如下。
1、選用與血清瓶規格相同的對照瓶。
2、在對照瓶中放入與血清體積相等的水。
3、溫度預檢。在對照瓶中插入2-3支選定的溫度計(以保證試驗溫度的準確性),放入水浴箱中,接通電源,調節溫控旋鈕,保持水浴箱中指示的溫度為56℃。
4、將無外泌體血清滅活血瓶和帶溫度計的對照瓶放入水浴箱,待溫度計指示的溫度升至56℃時,等待30分鐘。
5、大瓶游離外分泌血清滅活后,重新進行包裝。
6、儲存:分包裝后,取無外分泌體血清樣品進行無菌試驗,在-20~-70℃下儲存。