產(chǎn)品名稱:人卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株A2780/DDP
細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS+0.2μM DDP
凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO
運(yùn)輸方式:常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸
貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要2-3天(特殊情況會有說明)
質(zhì) 控:無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
研究范圍:僅供科研使用
人卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株A2780/DDP
我司是一家專注于生命科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,一站式采購商城,代理亞洲、歐美國家300多種品牌,200萬種以上產(chǎn)品。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得*。
我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!
我司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過不斷改進(jìn)來提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。“誠信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!
一、客戶收到細(xì)胞后需注意事項(xiàng):
1、收到細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。由于運(yùn)輸途中的影響,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理。
3、收到細(xì)胞后,請顯微鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的*培養(yǎng)液,使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以提高5%去培養(yǎng)。若細(xì)胞達(dá)到80%左右,血清濃度按照說明書要求進(jìn)行調(diào)配。
4、收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng),懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
6、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,即可傳代。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二、培養(yǎng)注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后,再進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞系的操作。
2、無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70% ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之中央無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
3、工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
三、培養(yǎng)的相關(guān)知識:
1、在細(xì)胞凍存時(shí)加入溫保護(hù)劑,能大大提高凍存效果。常用的低溫保護(hù)劑是DMSO,它是一種滲透性保護(hù)劑,可迅速透入細(xì)胞,提高胞膜對水的通透性,降低冰點(diǎn),延緩凍結(jié)過程,能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外,在胞外形成冰晶,減少胞內(nèi)冰晶,從而減少冰晶對細(xì)胞的損傷。
2、細(xì)胞的凍存:先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。接著置于-20℃冰箱,約30-60min。再接著置于-80℃超低溫冰箱中放置,置于液氮罐中長期保存。同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇應(yīng)遵守慢凍快融的原則。
我公司所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。我公司細(xì)胞研究中心承諾盡大努力對實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于當(dāng)時(shí)的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性,從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考,使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害。本公司所有細(xì)胞入庫之前均經(jīng)過嚴(yán)格的細(xì)胞質(zhì)量檢測和鑒定,所有細(xì)胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴(yán)格的質(zhì)檢認(rèn)證,確保細(xì)胞到每一位用戶手里都是*狀態(tài)。我司匯集了一批專業(yè)的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)人員,以*的技術(shù)支撐產(chǎn)品,歡迎廣大用戶選購。