產(chǎn)品名稱:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞BT-474(熱銷)
細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:1640+10%FBS
運輸方式:常溫順豐運輸和干冰順豐運輸
貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要3-5天(特殊情況會有說明)
質(zhì) 控:無支原體、無污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
研究范圍:僅供科研使用
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞BT-474(熱銷)?
品 牌:Gemini血清
貨 號:900-108、100-500、100-512
庫 存: 常備現(xiàn)貨
溫馨提示:本產(chǎn)品僅限于非臨床科研用途。
運輸保存及注意點:
1.干冰全程運輸,保證您的使用!
2.-20℃,避光恒溫冰箱,避免反復(fù)凍融!
我司主營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒、Sigma現(xiàn)貨試劑等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!
細(xì)胞培養(yǎng)方法
一、準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作對開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。
二、取材
在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器皿中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的*培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。
理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。
取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時應(yīng)嚴(yán)格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。
三、培養(yǎng)
將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基。如系細(xì)胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長狀態(tài)。
正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時檢查。一般原代培養(yǎng)進(jìn)入培養(yǎng)后有一段潛伏期(數(shù)小時到數(shù)十天不等),在潛伏期細(xì)胞一般不分裂,但可貼壁和游走。過了潛伏期后細(xì)胞進(jìn)入旺盛的分裂生長期。
細(xì)胞長滿瓶底后要進(jìn)行傳代培養(yǎng),將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代”。二倍體細(xì)胞一般只能傳幾十代,而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可無限地傳代下去。轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能具有惡性性質(zhì),也可能僅有不死性而無惡性。培養(yǎng)正在生長中的細(xì)胞是進(jìn)行各種生物醫(yī)學(xué)實驗的良好材料。
四、凍存及復(fù)蘇
為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度—-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。
在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。凍存過程中保護(hù)劑的選用、細(xì)胞密度、降溫速度及復(fù)蘇時溫度、融化速度等都對細(xì)胞活力有影響。
擴(kuò)展資料:進(jìn)入細(xì)胞間開始細(xì)胞培養(yǎng)時,注意事項:
①確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題,不確定的溶液和耗材請勿使用,除非特殊情況,不要借用別人的溶液。
②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。
③確定酒精燈內(nèi)的酒精量,需要的話及時進(jìn)行補(bǔ)充。
④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋,實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。
⑤盡量不要直接傾倒溶液,除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗,溶液粘在瓶口,請用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍(不要接觸到瓶口)后在火焰上簡單燒灼。
⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的,必須及時更換。
⑦實驗完畢及時收拾,保持工作區(qū)域清潔整齊,后用75%酒精清潔臺面。
Hyclone胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML
Hyclone優(yōu)等胎牛血清FBS SH30406.05 New Zealand 500ML
Hyclone特級胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML
Hyclone特級胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML
Hyclone活性炭/葡聚糖處理 SH30068.03 USA 500ML
Hyclone馬血清 SH30074.03 USA 500ML
Hyclone烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 Uruguay 500ML
Hyclone標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清 SH30071.03 USA 500ML
Hyclone優(yōu)等胎牛血清 SV30160.03 SOUTH AMERICA 500ML
Hyclone新生牛血清 SH30413.02 New Zealand 500ML
BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML
BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS New Zealand 500ML
BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS AUSTRALIA 500ML
BOVOGEN新生牛血清 New Zealand 500ML
PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML
PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML
BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML
BI ES級別胎牛血清 04-002-1A SOUTH AMERICA 500ML
BI 間充質(zhì)干細(xì)胞胎牛血清 04-400-1A SOUTH AMERICA 500ML
Corning康寧優(yōu)等胎牛血清 35-076-CV AUSTRALIA 500ML
PAN胎牛血清FBS P30-3302 SOUTH AMERICA 500ML
PAN胎牛血清FBS ST30-3302 SOUTH AMERICA 500ML
PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 SOUTH AMERICA 500ML
PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P SOUTH AMERICA 500ML
NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE 阿根廷 500ML
Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 SOUTH AMERICA 500ML
Gemini特級胎牛血清 100-500 USA 500ML
Gemini科研用人AB血清 100-512 USA 100ML
TCB胎牛血清 101ZC New Zealand 500ML
Sigma 特級胎牛血清 F2442 USA 500ML
Sigma正常人AB血清 H4522 USA 100ML
SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1 USA 50ML