SIGMA胎牛血清|F2442-500ml
名稱:胎牛血清
貨號(hào):F2442-500ML
品牌:SIGMA
干細(xì)胞是在所有多細(xì)胞生物中發(fā)現(xiàn)的原始細(xì)胞。
它們保留了通過(guò)有絲分裂細(xì)胞分裂來(lái)更新自身的能力,并且可以分化成多種專門細(xì)胞類型。
哺乳動(dòng)物干細(xì)胞的三大類是:源自胚泡的胚胎干細(xì)胞,在成人組織中發(fā)現(xiàn)的成年干細(xì)胞和在臍帶中發(fā)現(xiàn)的臍帶血干細(xì)胞。
在發(fā)育中的胚胎中,干細(xì)胞可以分化為所有專門的胚胎組織。
在成年生物中,干細(xì)胞和祖細(xì)胞可作為人體的修復(fù)系統(tǒng),補(bǔ)充專門的細(xì)胞。
由于干細(xì)胞可以通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)而生長(zhǎng)并轉(zhuǎn)化為具有與諸如肌肉或神經(jīng)等各種組織的細(xì)胞一致的特性的特化細(xì)胞,因此提出了將其用于醫(yī)學(xué)治療中。
特別是,胚胎細(xì)胞系,通過(guò)治療性克隆產(chǎn)生的自體胚胎干細(xì)胞以及來(lái)自臍帶血或骨髓的高可塑性成年干細(xì)胞被吹捧為有前途的候選者。
醫(yī)學(xué)研究人員認(rèn)為,干細(xì)胞療法有可能從根本上改變?nèi)祟惣膊〉闹委煼椒ā?/span>
已經(jīng)存在許多成人干細(xì)胞療法,尤其是用于治療白血病的骨髓移植。
在干細(xì)胞研究中,有時(shí)需要體外培養(yǎng)和分析細(xì)胞。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian品牌特級(jí)進(jìn)口胎牛血清,它的內(nèi)毒素小于3Eu/ml,使細(xì)胞更健康,客戶做實(shí)驗(yàn)更加順利。
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根據(jù)您的特定細(xì)胞培養(yǎng)需求(從基礎(chǔ)研究到專業(yè)檢測(cè))選擇適合的胎牛血清。無(wú)論您是需要具有低病毒風(fēng)險(xiǎn)、低內(nèi)毒素水平的胎牛血清,還是需要適用于特殊應(yīng)用和分析的血清,Gibco 產(chǎn)品都能提供越的價(jià)值。
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BSE 風(fēng)險(xiǎn)最小且病毒風(fēng)險(xiǎn)較低的血清
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多達(dá) 90 項(xiàng)質(zhì)量測(cè)試,包括 EMA 病毒檢測(cè);USP/EP 支原體,內(nèi)毒素,性能;生化/激素分析;Oritain 指紋識(shí)別
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12、使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么?
EDTA用來(lái)螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細(xì)胞前,用EDTA清洗細(xì)胞,以消除來(lái)自培養(yǎng)基中所有的二價(jià)離子。
13、可否使用與原先不同的培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),易造成細(xì)胞狀態(tài)不好,最終造成細(xì)胞無(wú)法存活。
14、可否使用與原先不同的血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
15、細(xì)胞為何生長(zhǎng)不均勻?
細(xì)胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒(méi)有搖勻,或者放入時(shí)搖勻,但在細(xì)胞貼壁前,又移動(dòng)了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動(dòng)或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過(guò)少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會(huì)導(dǎo)致16、購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。運(yùn)輸過(guò)程對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
17、細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理?
一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過(guò)細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15 ml離心管中,靜置20 min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。
18、細(xì)胞內(nèi)有空泡,是否是正常現(xiàn)象?
部分細(xì)胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個(gè)是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,可以通過(guò)調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時(shí)間等方法來(lái)調(diào)整細(xì)胞狀態(tài);如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,且單個(gè)細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細(xì)胞代次較高,細(xì)胞老化所致,需更換代次較早的細(xì)胞。
19、細(xì)胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因
很可能是培養(yǎng)體系不適合細(xì)胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過(guò)度,對(duì)細(xì)胞有嚴(yán)重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細(xì)胞,傳代太稀;或者生長(zhǎng)較快的細(xì)胞,傳代較密,細(xì)胞嚴(yán)重堆疊生長(zhǎng))。
20、細(xì)胞生長(zhǎng)逐漸變慢是什么原因?
細(xì)胞增殖變慢有以下原因:1. 消化過(guò)度 2. 傳代過(guò)密 3.細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不良 4.細(xì)胞頻繁傳代 5.細(xì)胞狀態(tài)不佳或老化 6.細(xì)胞存在污染。
21、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5%或10%CO2?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10% CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時(shí),則應(yīng)使用5% CO2培養(yǎng)細(xì)胞。
22、CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?
定期(每周一次)更換水盤里面的水,水盤的水必須使用無(wú)菌蒸餾水或無(wú)菌去離子,水盤中可添加1%硫酸銅以預(yù)防霉菌污染。
23、細(xì)胞接種密度多少合適?
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)的一個(gè)重要原因。按照我們的經(jīng)驗(yàn):一般倍增時(shí)間24 h內(nèi)的細(xì)胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時(shí)間24-48 h的細(xì)胞,傳代比率1:3-1:8為宜,倍增時(shí)間超過(guò)48h的細(xì)胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。
SIGMA胎牛血清|F2442-500ml
人胰腺癌細(xì)胞 PATU8988S
人前列腺癌 PC-3
人肺癌細(xì)胞 pc-9
人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞 PL45
人肝癌細(xì)胞 PLC/PRF/5
人胚腎細(xì)胞 ProPakA.6
人正常肝細(xì)胞 QSG-7701
人淋巴瘤細(xì)胞 Raji
人B淋巴瘤細(xì)胞 RAMOS RA1
人肝膽管癌細(xì)胞 RBE
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 RD
人急性非B非T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 REH
人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 RL95-2
人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 RPMI8226
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 RKO
人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤 RT4
人前列腺正常細(xì)胞 RWPE-1
人前列腺正常細(xì)胞 RWPE-2
人小細(xì)胞肺癌 SBC-2
人膀胱鱗癌細(xì)胞 SCaBER
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染野生型
人子宮頸鱗癌細(xì)胞 SIHa
人乳腺癌細(xì)胞 SK-BR-3
人乳腺癌細(xì)胞 SK-BR-3+IUC
人肝腹水腺癌細(xì)胞 SK-HEP-1
人低分化肺腺癌細(xì)胞 SK-LU-1
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞 SK-MEL-2
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-MEL-2+LUC
人肺鱗癌細(xì)胞 SK-MES-1
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 SK-N-MC
人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-SH
人卵巢癌細(xì)胞 SK-OV-3
人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 SK-OV-3+LUC
人肝癌細(xì)胞 smmc-7721
人腦膠質(zhì)瘤 SNB-19
人肝癌細(xì)胞 snu-1
人肝癌細(xì)胞 Snu-182
人膀胱上皮永生化細(xì)胞 sv-huc-1
人滑膜肉瘤細(xì)胞 SW982 [SW-982]
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW1116
人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW-13
人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW1353
人胰腺癌細(xì)胞 SW1990
人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 SW480
人甲狀腺癌細(xì)胞 SW579
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 SW620
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞+GFP SW620+GFP
人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株 SW620/5FU
人膀胱移行細(xì)胞癌 SW780
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 T47D
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 T98G
人食管癌細(xì)胞 TE-1
人食管癌細(xì)胞 TE-12
人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 thp-1
人腦膠質(zhì)瘤 TJ905
人乳頭狀甲狀腺癌細(xì)胞株 TPC-1
24、培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn),是污染嗎?
首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒(méi)有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則,是否運(yùn)動(dòng),是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則,做布朗運(yùn)動(dòng),黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過(guò)度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致,快速移動(dòng),很可能是細(xì)菌污染。
25、如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?
掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī),不要細(xì)胞長(zhǎng)老了再傳代;掌握好消化時(shí)間,防止消化過(guò)度產(chǎn)生細(xì)胞碎片;減少血清等試劑的凍融次數(shù);將培養(yǎng)液的PH調(diào)到最佳;嚴(yán)格控制水質(zhì)和器皿的清潔。26、黑點(diǎn)已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進(jìn)行處理?
如果判定黑點(diǎn)是污染,請(qǐng)及時(shí)將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進(jìn)行:
如果是懸浮細(xì)胞:收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS洗2-3遍,洗的時(shí)候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時(shí)先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來(lái),去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶,并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。
27、培養(yǎng)用dish,flask是否相同?
不同廠牌的dish或flask,其所coating的polymer不同,制造程序亦不同,雖對(duì)大部分細(xì)胞沒(méi)有太大之影響,惟少數(shù)細(xì)胞則可能因使用廠牌不同之dish或flask而有顯著之生長(zhǎng)差異。