WinSera熱滅活胎牛血清
產(chǎn)品名稱:熱滅活胎牛血清
英文名稱:Heat-inactivated fetal bovine serum
規(guī)格:500ml
品牌:WinSera ®(千舍出品)
品牌:WINSERA®國(guó)內(nèi)科研實(shí)驗(yàn)室使用比較普遍,價(jià)格相對(duì)實(shí)惠,能滿足很多常規(guī)細(xì)胞的培養(yǎng)需求。
相對(duì)而言,國(guó)產(chǎn)品牌血清由于采血的不可控性和生產(chǎn)工藝的差別,質(zhì)量參差不齊,最讓人擔(dān)心的還是批間差異大,質(zhì)量不穩(wěn)定。
它來了 它來了 2022它風(fēng)風(fēng)火火的走來了~~
WINSERA®胎牛血清 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 庫(kù)存狀態(tài) |
優(yōu)級(jí) | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級(jí) | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級(jí)別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現(xiàn)貨 |
童鞋甲:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養(yǎng)的細(xì)胞是什么,一般的話估計(jì)問題不大,要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點(diǎn)啊。
童鞋乙:熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì), 在對(duì)補(bǔ)體滅活以外,熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用。現(xiàn)在好像不主張熱滅活,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,此外,有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。
專家A:實(shí)驗(yàn)顯示,即使對(duì)血清進(jìn)行正確的熱滅活處理,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言也是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。
而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
因此若非必須,可以不需要做熱處理這一步.如此一來,不但節(jié)省寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。
專家B:血清從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍,然后混勻分裝成兩份,一份滅活,一份不滅活,比較這兩種血清對(duì)細(xì)胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個(gè)過程最多也就一個(gè)星期。同時(shí)你還要考慮血清滅活與否對(duì)你后續(xù)的實(shí)驗(yàn)有沒有影響。
一般來說,像巨噬細(xì)胞或者能被補(bǔ)體激活的而影響實(shí)驗(yàn)過程或者結(jié)果的細(xì)胞,血清在使用前必須滅火,還有就是原代細(xì)胞,這類細(xì)胞必須使用滅活血清;但是像其他細(xì)胞株,沒必要的。因?yàn)闇缁疬^程中不僅會(huì)滅火補(bǔ)體,還能損傷血清中的其他物質(zhì),不利于細(xì)胞生長(zhǎng)。
最后是老營(yíng)長(zhǎng)的總結(jié)
(科學(xué)面對(duì)血清熱滅活的爭(zhēng)議)
成為常規(guī)操作的血清熱滅活
至少70%的研究者對(duì)血清的滅活僅僅是因?yàn)樽裾粘R?guī)操作,或者說認(rèn)為是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高,許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立,只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效性和必要性。
熱敏補(bǔ)體與熱滅活
熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。Triglia和Linscott曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1,C6僅達(dá)成年動(dòng)物血清的1-3%,而其它補(bǔ)體成分僅有成年動(dòng)物的5-50%,至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補(bǔ)體固定實(shí)驗(yàn),我們也在多個(gè)不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。即使是在未稀釋的血清中,也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。
另外,多數(shù)實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過程,也對(duì)熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。
支原體與熱滅活
在對(duì)補(bǔ)體滅活以外,熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用。多年以前,450納米孔徑的濾膜被用于加工血清時(shí),血清中支原體的污染時(shí)有發(fā)生。針對(duì)這個(gè)問題,HyClone使用100納米三層濾膜連續(xù)濾過技術(shù),自從采用這項(xiàng)技術(shù)以及后來的40納米濾過技術(shù)之后,我們的血清產(chǎn)品中沒有再發(fā)現(xiàn)有支原體的污染,也是使得熱滅活成為不必要的另外一個(gè)原因。
人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)培養(yǎng)體系
iPS細(xì)胞培養(yǎng)添加劑(配套)
iPS細(xì)胞消化液(相關(guān)1)
matrix基質(zhì)膠(相關(guān)2)
iPS細(xì)胞專用因子Y27632(相關(guān)3)
H9人類胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系
H9細(xì)胞培養(yǎng)添加劑(配套)
H9細(xì)胞消化液(相關(guān)1)
matrix基質(zhì)膠(相關(guān)2)
H9細(xì)胞專用因子Y27632(相關(guān)3)
H1人類胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系
H1細(xì)胞培養(yǎng)添加劑(配套)
H1細(xì)胞消化液(相關(guān)1)
matrix基質(zhì)膠(相關(guān)2)
H1細(xì)胞專用因子Y27632(相關(guān)3)
干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒(培養(yǎng)體系)
干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒(培養(yǎng)體系)
干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化試劑盒(培養(yǎng)體系)
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代成纖維細(xì)胞無血清培養(yǎng)基
原代平滑肌細(xì)胞低血清培養(yǎng)體系
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代星狀細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代間充干細(xì)胞無血清培養(yǎng)體系
原代間充干細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代雪旺細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代黑色素細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代成骨細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代軟骨細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代肥大細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代樹突狀(DC)細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代破骨細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代NK細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代精原細(xì)胞培養(yǎng)體系
WinSera熱滅活胎牛血清
原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系
原代CIK細(xì)胞培養(yǎng)體系
胚胎發(fā)育與熱滅活
Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化;有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用,在用SV-BHK、BALB-3T3、CV-1、FS-4細(xì)胞對(duì)細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)中,熱滅活對(duì)胎牛血清的影響小于對(duì)小牛血清的影響。
細(xì)胞株生長(zhǎng)與熱滅活
我們調(diào)查了熱滅活對(duì)胎牛血清以及對(duì)其中不同細(xì)胞株生長(zhǎng)能力的影響。通過比較11個(gè)不同細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6個(gè)細(xì)胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細(xì)胞,MRC-5)的生長(zhǎng)帶來負(fù)面影響,三個(gè)細(xì)胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個(gè)細(xì)胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細(xì)胞生長(zhǎng)有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒有明顯的促進(jìn)作用。
沉淀與熱滅活
在正常操作下,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面的影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個(gè)現(xiàn)象之后,為了驗(yàn)證污染的存在,或者促進(jìn)沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟,血清中的蛋白進(jìn)一步的析出,為了確信血清未被污染,進(jìn)行的鏡檢,無菌培養(yǎng)試驗(yàn),和革蘭氏染色試驗(yàn)更是浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)者大量的時(shí)間和精力。
結(jié)論
總之,多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議,對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過試驗(yàn)來證實(shí)其必要性,確定滅活的適當(dāng)條件;在滅活過程中,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè),并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。