您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:蘇州千舍生物科技有限公司> 供求商機(jī)> mpc5-小鼠足細(xì)胞mpc5
產(chǎn)品名稱:小鼠足細(xì)胞mpc5
細(xì)胞規(guī)格:1-3×10^6細(xì)胞量
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:DMEM+10% FBS
運(yùn)輸方式:常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸
貨 期:復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周,凍存細(xì)胞的需要3-5天(特殊情況會(huì)有說(shuō)明)
質(zhì) 控:無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
研究范圍:僅供科研使用
小鼠足細(xì)胞mpc5
我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購(gòu)!
我司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過(guò)不斷改進(jìn)來(lái)提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。“誠(chéng)信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1. 剪切組織 先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用手術(shù)刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2. 消化分離 消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3. 培養(yǎng) 細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 細(xì)胞/毫升,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
(1)無(wú)菌操作:細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見(jiàn)原因,必須加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的無(wú)菌操作觀念,以預(yù)防為主,一旦污染,一般很難消除。
(2)培養(yǎng)液:所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長(zhǎng)的必要條件。由于細(xì)胞來(lái)源的動(dòng)物種類、組織類型不同,對(duì)培養(yǎng)液的要求有一定的差異,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)血清:血清對(duì)于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用。可選擇多種不同批號(hào)的血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號(hào)血清后,就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)膠原酶溶液:必須新鮮配制,貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(即使是-20℃低溫保存),也將影響消化效力,導(dǎo)致消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)胞損傷增加。
(5)L-谷氨酰胺:幾乎所有細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)因生長(zhǎng)不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時(shí),就應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷氨酰胺。
(6)靜置培養(yǎng):原代細(xì)胞在消化分離后,置于CO2培養(yǎng)箱的頭24~48h (必要時(shí)72h)內(nèi),應(yīng)處于靜置狀態(tài),切忌不時(shí)地取出培養(yǎng)瓶觀察生長(zhǎng)狀況,這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁,更談不上伸展和增殖,初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)消耗光,在細(xì)胞增殖之前對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中*的除了培養(yǎng)基,胰酶也是非常重要的一個(gè)角色,雖然細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)基本技術(shù)大同小異,每種細(xì)胞的培養(yǎng)條件各不相同,但是,在細(xì)胞傳代過(guò)程中都少不了這個(gè)步驟—胰酶消化。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中為什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?
胰酶是一種蛋白酶,酶切位點(diǎn)是肽鏈的Lys或Arg兩個(gè)殘基的羧基端肽鏈,通過(guò)在特定位置上降解蛋白,使細(xì)胞膜上與培養(yǎng)皿壁結(jié)合處蛋白降解,從而使兩者分離。這時(shí),細(xì)胞由于自身內(nèi)部細(xì)胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力可成為球形。
使用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,在使用胰酶消化時(shí)發(fā)現(xiàn)血清可以終止此過(guò)程,這是什么原因?
血清終止的原理其實(shí)是競(jìng)爭(zhēng)抑制,就是用過(guò)量的牛血清中含有的蛋白和胰酶結(jié)合,使胰酶失去消化細(xì)胞蛋白的機(jī)會(huì)。
為什么使用了胰蛋白酶消化,細(xì)胞還是成團(tuán)的,這可能是什么原因?qū)е碌模?/span>
消化時(shí)間不夠 ② 吹打力度不夠 ③ 胰酶消化液濃度不夠 ④ 細(xì)胞密度過(guò)高之后才消化傳代 ⑤ 胰酶存儲(chǔ)不當(dāng),或者使用了過(guò)期胰酶
胰酶分裝凍存時(shí)要注意什么?
胰酶分裝時(shí)盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因?yàn)槔鋬霰4鏁r(shí)體積會(huì)膨脹,多次使用同一瓶胰酶反復(fù)凍融會(huì)降低消化效果并增大污染的可能性。
怎么才能判斷胰酶消化*?
注意:不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才表示消化好了。
一般肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙狀移動(dòng)就可以了,就應(yīng)該停止消化。
胰酶適用于哪些細(xì)胞消化?它的消化效果與哪些有關(guān)呢?
胰酶適用于消化細(xì)胞間質(zhì)較少的軟組織和傳代細(xì)胞,如胚胎、上皮、肝、腎等組織,但對(duì)纖維性組織和較硬的癌組織效果較差。胰酶的消化效果主要與pH值、溫度、胰酶濃度、組織塊大小和硬度有關(guān)。
胰酶中的酚紅有哪些作用?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為pH指示劑,中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明:酚紅可以模擬固醇類激素(特別是雌激素)的作用。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),建議用不含酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),也會(huì)使用不含酚紅的培養(yǎng)基或者胰酶。
在做細(xì)胞凋亡檢測(cè)時(shí),細(xì)胞為什么不能用含有EDTA的胰酶消化?
Annexin V(膜聯(lián)蛋白)是Ca2+依賴的蛋白,EDTA會(huì)螯合Ca2+從而影響Annexin V,進(jìn)而影響結(jié)果,因此需選用不含EDTA的胰酶。建議放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行消化,時(shí)間可以長(zhǎng)一點(diǎn)。隨時(shí)觀察細(xì)胞情況,避免消化過(guò)度;也可使用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞刮下,后用槍吹勻,比消化簡(jiǎn)單,還可避免使用胰酶帶來(lái)的傷害。
MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐藥株
HCT8/5-fu 人回腸直腸腺癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
LOVO/5-FU 人結(jié)腸癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
HCT116/L人結(jié)腸癌奧沙利鉑耐藥細(xì)胞
HL60/ADR人早幼粒急性白血病細(xì)胞耐阿霉素株
PC9GR(PC9R)人肺癌細(xì)胞耐吉非替尼
LOVO/ADR人結(jié)腸癌細(xì)胞阿霉素耐藥株
HNE1/DDP人鼻咽癌細(xì)胞順鉑耐藥株
SGC7901/5-fu人胃癌細(xì)胞五氟尿嘧啶耐藥株
A549/DDP人肺癌細(xì)胞順鉑耐藥株
MCF-7/DDP人乳腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株
A549/ADR人肺癌細(xì)胞阿霉素耐藥株
SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞順鉑耐藥株
SKOV3/DDP人卵巢癌細(xì)胞順鉑耐藥株
HELA/DDP人宮頸癌耐順鉑細(xì)胞株
3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞
Raw264.7小鼠單核巨噬白血病細(xì)胞
B16-F10小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)細(xì)胞
B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞
CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細(xì)胞
F9 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
MLE-12 小鼠肺泡上皮細(xì)胞
Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
BV2 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
DC2.4小鼠樹突狀細(xì)胞
U14 小鼠子宮頸癌細(xì)胞
M-NFS-60小鼠骨髓性白血病細(xì)胞
mMSC小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
HL-1小鼠心肌細(xì)胞
TM3 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞
k7m2.wt小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞
mc3t3 e1小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞
hepa1-6 小鼠肝癌細(xì)胞
SP2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞
HT22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系
MC38小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
mpc5小鼠足細(xì)胞
4T1 小鼠乳腺癌細(xì)胞
ANA-1小鼠巨噬細(xì)胞
TM4 小鼠睪丸支持細(xì)胞
STO 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
bend.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
J774A.1小鼠單核巨噬細(xì)胞
H9C2 大鼠心肌細(xì)胞
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
AR42J 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞
IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞
RT4-D6P2T 大鼠神經(jīng)鞘瘤細(xì)胞
INS-1 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞
NRK-52E 大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞
BHK-21 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞
PK-15 豬腎細(xì)胞
Duckembyro 鴨胚胎成纖維細(xì)胞
vero 綠猴腎細(xì)胞
Hep3B人肝癌細(xì)胞
HPAC人胰腺癌細(xì)胞
HT-1376 人膀胱癌細(xì)胞
JAR 人胎盤絨毛癌細(xì)胞
KNS-89 人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
LN229 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
LNCaP clone FGC 人前列腺癌細(xì)胞
MDA-KB2 人乳腺細(xì)胞
MDA-MB-361 人乳腺癌細(xì)胞
MET-5A 人膜間皮細(xì)胞
MGC-803 人胃癌細(xì)胞
NCI-H1650 人肺支氣管癌細(xì)胞
RT4 人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤
SK-N-MC 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞
SK-N-SH 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
SW982 人滑膜肉瘤細(xì)胞
T98G 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
U251MG(KO) 人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞
U266 人骨髓瘤細(xì)胞
VCAP 人前列腺癌細(xì)胞
hTERT-HPNE 人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞
NCI-H1650人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞
HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HEK293 人胚腎細(xì)胞
HEPG2 人肝癌細(xì)胞
HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化)
HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞
HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
KYSE150人食道癌細(xì)胞
L02(HL7702)人正常肝細(xì)胞
LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞
MCF-10A人正常乳腺上皮細(xì)胞
MCF7人乳腺癌細(xì)胞
LX-2 人肝星狀細(xì)胞
MDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞
Hyclone胎牛血清 Sv30087.01
Hyclone胎牛血清 Sv30087.02
Hyclone胎牛血清 SH30084.03
Hyclone優(yōu)等胎牛血清 SH30406.02
Hyclone優(yōu)等胎牛血清 SH30406.05
Hyclone特級(jí)胎牛血清 SH30396.03
Hyclone特級(jí)胎牛血清 SH30070.03
Hyclone特級(jí)胎牛血清 SH30070.03E
Hyclone胎牛血清 SH30370.03
活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清,熱滅活 SH30068.03HI
馬血清SH30074.03
烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03
Hyclone胎牛血清SH30071.03
Hyclone胎牛血清SV30160.03
胎牛血清FBS SFBS
新生牛血清 SNCS
PAA 普通胎牛血清FBS A15-101
PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151
BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS
BI ES級(jí)別胎牛血清 04-002-1A
BI 間充質(zhì)胎牛血清 04-400-1A
Corning胎牛血清 35-076-CV
PAN胎牛血清FBS P30-3302
PAN胎牛血清FBS ST30-3302
PAN ES級(jí)別胎牛血清 ST30-2602
PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P
NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE
Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108
Gemini特級(jí)胎牛血清 100-500
Gemini科研用人AB血清100-512
TCB胎牛血清 101ZC
Sigma 特級(jí)胎牛血清 F2442
Sigma正常人AB血清 H4522
SBI 無(wú)外泌體血清 EXO-FBS-50A-1
胎牛血清10270106、10099-141、10091-148、10099-133、10100-147、16010159、A31608-02、16050-122、30067334、10437-028等優(yōu)質(zhì)胎牛血清
雙抗 15140-122、SV30010
胰酶 25200-056、SH30042.01
GIBCO 胰酶 25200-072
DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT
DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT
PBS C10010500BT
1640培養(yǎng)基 C11875500BT
DMEM/F12 C11330500BT
MEM培養(yǎng)基 C11095500BT
α-MEM C12571500BT
DMEM低糖 SH30021.01
DMEM高糖 SH30022.01、SH30243.01
DMEM/F-12 1:1 SH30023.01
MEM/EBSS SH30024.01
PBS緩沖液 SH30256.01
α-MEM SH30265.01
RPMI-1640 SH30809.01
DPBS SH30028.02
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。